[发明专利]分离提纯Maillard反应中间体Amadori化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离提纯美拉德Maillard反应中间体阿玛杜里Amadori化合物的方法。

背景技术

阿玛杜里Amadori化合物是由氨基酸与还原糖发生美拉德Maillard反应过程中的中间产物，还原糖的羰基与氨基之间进行加成，加成物迅速失去1分子水转变为希夫碱，再经环化形成相应的N-取代的醛，经Amadori重排转成有反应活性的1-氨基-1-脱氧-2-酮糖。这种中间体大多为白色或略带黄色的固体，易溶于水，没有气味，但通过加热，很容易裂解产生具有令人愉悦的芳香气味化合物如吡嗪类、呋喃类以及吡喃类化合物等，是一种重要的烟草香味前体物。Amadori化合物除了作为香味前提物，还是一种优良的抗氧化剂，能够除活性氧自由基。

国外对Amadori化合物的研究始于50年代，70年代国外烟草公司研究比较多。M.Noguchi(1971)研究烤烟中的Maillard反应在调制的干燥阶段进行较快，调制后烟叶中Amadori化合物可占烟叶重量的2％。烤烟中含量最大的Amadori化合物是葡萄糖和脯氨酸形成的1-L-脯氨酸-1-脱氧-D-果糖。日本专利(1971-9239)，用糖和氨基酸的缩合产物1-L-脯氨酸-1-脱氧-D-果糖作为烟草香料，这些香料是通过某种氨基酸与糖在水或醇溶剂中，酸催化剂如丙二酸的存在下制备的，并用离子交换树脂将这种化合物分离，纯化，再应用到烟草中。日本专利(1973-3398)介绍其它一些特定的氨基酸与糖的缩合产物如1-L-丙氨酸-1-脱氧-D-果糖，这种化合物是以其相应的底物在苹果酸催化剂存在下，于130℃下加热15分钟，通过Amadori重排合成的，它与可可粉混合，作为烟草增香。James P(1977)研究在烤烟醇化过程中加入还原糖、氨基酸、Fru-Pro和酪蛋白水解液，结果显示添加这些外源性物质可以不同程度提高烤烟的醇化效果。Nicol(1982)采用半制备液相色谱分离鉴定了Leu-Fru、Hyp-Fru、Trp-Fru和Ala-Fru四种Amadori化合物，采用甲醇-水体系、氨基键合硅胶凝胶色谱柱分离。Bergter(1990)采用高效液相色谱柱后衍生测定烟草中的Amadori中间体含量，结果显示烤烟中Fru-Pro的含量最高达1.45mg/g，含量次高的是Fru-Ala，达0.83mg/g。张敦铁等(2003)研究了1-L-丙氨酸-1-脱氧-D-果糖、1-L-缬氨酸-1-脱氧-D-果糖、1-L-脯氨酸-1-脱氧-D-果糖三种Amadori化合物的热降解，结果显示降解产物主要为醛类、吡嗪类、呋喃、呋喃酮、吡喃酮、吡咯等杂化化合物，这些物质是烟草中的重要致香成分。王军(2007)使用串联质谱方法定性研究卷烟中含有的多种Amadori化合物，总计在烟草中定性出八种Amadori化合物中间体。

国外Amadori化合物对卷烟感官质量影响研究也比较多，Nishi(1965)报道了从甘草根中分离四种Amadori化合物，添加到卷烟中可以改善烟气感官质量。Takahara(1971)在卷烟中添加了来源于可可粉中的Amadori化合物，结果显示可以明显改善烟气香味和吃味。雷诺烟草公司的Dickerson(1972)在烤烟中加入Amadori化合物改善烟气质量。Joyce H(1977)合成了十二种Amadori化合物，对其裂解产物进行GC/MS分析，并添加到烟草中评价其作用，其中以Fru-gly效果为好.

目前，合成Amadori化合物的方法主要是“回流”法，通常是通过氨基酸与葡萄糖直接在无水甲醇中回流数小时，由于副反应比较多，要得到纯度较高Amadori化合物，则必须经过提纯。在已有的Amadori化合物分离提纯技术中，主要有阳离子交换树脂分离、纤维素柱分离、硅胶柱分离等，但这三种方法也只应用于实验室小量制备，无法进行工业化生产。在这些方法中以阳离子交换树脂分离提纯应用最为广泛，提纯的纯度也较高，但是阳离子树脂洗脱较慢，操作繁琐耗时，离子交换树脂成本也较高。

发明内容

本发明是为避免上述现有技术所存在的不足之处，提供一种工艺流程简单、成本低、提纯纯度高、可进行的工业化生产的分离提纯Maillard反应中间体Amadori化合物的方法。

本发明解决技术问题采用如下技术方案：