[发明专利]三个棉花ABF/AREB/ABI5/DPBF类转录因子及其编码基因与应用有效
| 申请号: | 200910158311.X | 申请日: | 2009-07-06 |
| 公开(公告)号: | CN102060919A | 公开(公告)日: | 2011-05-18 |
| 发明(设计)人: | 张锐;郭三堆;梁成真 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所;张锐 |
| 主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/81;C12N15/82;C12R1/84 |
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| 地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 三个 棉花 abf areb abi5 dpbf 转录 因子 及其 编码 基因 应用 | ||
1.三个棉花bZIP类转录因子GhABF2、GhABF3、GhABI5,它们的氨基酸序列如SEQ ID NO:2、5、8所示。
2.三个棉花bZIP类转录因子GhABF2、GhABF3、GhABI5的编码基因GhABF2、GhABF3、GhABI5,其碱基序列分别如SEQ ID NO:1、4、7所示。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于:所述棉花bZIP类转录因子GhABF2、GhABF3、GhABI5的编码基因GhABF2、GhABF3、GhABI5的读码框分别为自SEQ ID NO:1的5’端自442位到1692位1251个碱基、自SEQ ID NO:4的5’端自333位到1553位1221个碱基、自SEQ ID NO:7的5’端自384位到1649位1266个碱基的DNA序列。
4.根据权利要求3所述的基因读码框,其特征在于:所述棉花bZIP类转录因子GhABF2、GhABF3、GhABI5的编码基因GhABF2、GhABF3、GhABI5的读码框在基因组上都含有4个Exon和3个Intron,RNA剪接完全符合“GT...AG”规律,三个基因读码框的基因组碱基序列如SEQ ID NO:3、6、9。
5.根据权利要求2所述基因的表达谱,其特征在于:
(1)1在棉花中的表达谱:根、茎、叶、花蕾、棉铃中表达,根茎叶中的表达量稍高,并且随花蕾的发育表达量不断升高;
(2)2在棉花中的表达谱:根、茎、叶、花萼以及花蕾中表达,根茎叶中的表达量稍高;
(3)3在棉花中的表达谱:根、茎、叶花、蕾中表达,棉铃中的表达量稍高。
6.根据权利要求2所述的表达载体。
7.根据权利要求6所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体为植物表达载体pBI121-GhABF2,RNAi-GhABF2-I、RNAi-GhABF2-II和酵母表达载体pPIC9.0k-GhABF2。
8.根据权利要求7中酵母表达载体,利用GS115酵母菌株表达蛋白大小如图3所示,转基因酵母在PEG6000及NaCl逆境环境下生长繁殖OD600如图4所示。
9.一种培育抗逆性植株的方法,包括根据权利要求7所述植物表达载体;用构建的表达载体转化植物细胞,和将转化的植物细胞培育成植株。
10.根据权利要求9所述的方法,所述的转化方法是通过农杆菌介导或花粉管通道法进行的。
11.按照权利要求10所述的方法,其中所述的目的植物是单子叶植物或双子叶植物。
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