[发明专利]多重PCR鉴定不产黄曲霉毒素黄曲霉的引物序列及方法无效
| 申请号： | 200910154898.7 | 申请日： | 2009-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN101701250A | 公开（公告）日： | 2010-05-05 |
| 发明（设计）人： | 尹燕妮;马忠华;刘馨;严蕾燕 | 申请（专利权）人： | 马忠华 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/67 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310029 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多重 pcr 鉴定 黄曲霉 毒素 引物 序列 方法 | ||
【权利要求书】：
1.多重PCR鉴定不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌的引物序列，其特征在于：包括4组引物，第一组引物的正向引物具有序列表中SEQ ID NO：1所述的碱基序列，第一组引物的反向引物具有序列表中SEQ ID NO：2所述的碱基序列；第二组引物的正向引物具有序列表中SEQ ID NO：3所述的碱基序列，第二组引物的反向引物具有序列表中SEQ ID NO：4所述的碱基序列；第三组引物的正向引物具有序列表中SEQ ID NO：5所述的碱基序列，第三组引物的反向引物具有序列表中SEQ ID NO：6所述的碱基序列；第四组引物的正向引物具有序列表中SEQ ID NO：7所述的碱基序列，第四组引物的反向引物具有序列表中SEQ ID NO：8所述的碱基序列。
2.一种多重PCR鉴定不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌的方法，包括以下步骤：
(1)提取待测菌的DNA；
(2)以待测菌的DNA为模板，使用四组引物进行PCR扩增；
(3)PCR产物经凝胶电泳分离后用EB进行显色；
当DNA条带数量为0-3时，判定待测菌为不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的PCR扩增的反应条件为：95℃预变性3min，94℃变性40s，55℃退火40s，72℃延伸1min，进行35个循环，最后72℃延伸5min。
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