[发明专利]丹参注射液中的化合物及其在心血管疾病治疗中的应用

权利要求书

1.一种酚酸类化合物丹酚酸M，其结构式为：

。

2.一种制备权利要求1所述的丹酚酸M的方法，其特征在于：取丹参注射液，过半制备色谱柱分离、纯化，冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即获得该化合物；

制备液相分离条件为：流动相由0.05％甲酸-水和乙腈组成，梯度洗脱程序为：0→28min→60min：乙腈：18％→18％→35％，流速4ml/min，分离用半制备色谱柱为Zorbax SB-C₁₈9.4mm×25cm 5μm，保留时间t_R＝22.1min。

3.一种制备权利要求1所述的丹酚酸M的方法，其特征在于：丹参药材加6-8倍量水煎煮二～三次，每次1.5～2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，乙醇沉淀二次，每次含醇量在75％～85％，滤过，滤液回收乙醇，蒸馏水稀释，静置过滤，过制备液相分离、纯化，冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即为该化合物；

制备液相分离条件为：流动相由0.05％甲酸-水和乙腈组成，梯度洗脱程序为：0→28min→60min，乙腈：18％→18％→35％，流速4ml/min，分离用半制备色谱柱为Zorbax SB-C₁₈9.4mm×25cm 5μm，保留时间t_R＝22.1min。

4.权利要求3所述的一种制备丹酚酸M的方法，其特征在于：取丹参1500g，加水8倍量煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至750ml；加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量为75％，第二次使含醇量为85％，每次均冷藏放置后滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至约250ml， 加蒸馏水稀释至400ml，混匀，静置，滤过；使用半制备色谱柱分离、纯化，冷冻干燥后得到淡黄色粉末，即获得该化合物；

制备液相分离条件为：流动相由0.05％甲酸-水和乙腈组成，梯度洗脱程序为：0→28min→60min：乙腈：18％→18％→35％，流速4mL/min，分离用半制备色谱柱为Zorbax SB-C₁₈9.4mm×25cm 5μm，保留时间t_R＝22.1min。

5.权利要求1所述的丹酚酸M在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

6.一种丹参注射液指纹图谱构建方法，其特征是：

指纹图谱中包含权利要求1所述的丹酚酸M的特征峰，丹酚酸M的保留时间为17.0min；

丹参注射液50μL，重蒸水稀释至200μL，HPLC进样量20μL；

色谱条件：色谱柱Agilent Zorbax SB-C₁₈ 4.6mm×250mm 5μm，流速0.5ml/min，柱温30℃；

流动相为0.05％甲酸-水和0.05％甲酸-乙腈，采用梯度洗脱：0→10min→30min→50min，0.05％甲酸-乙腈：10％→20％→47％→100％；DAD检测器，检测波长190～400nm；

质谱检测器，ESI电离源，负离子，采用全扫描模式，扫描范围m/z 100～1000，电力电压150V，干燥氮气流速9.5L/min，干燥气体温度350℃，毛细管电压3000V。