[发明专利]用于检测膜上活细胞的包含NOG、HMP、氯化铷和/或氯化锂的细胞透化组合物有效
| 申请号: | 200910132916.1 | 申请日: | 2009-03-31 |
| 公开(公告)号: | CN101551333A | 公开(公告)日: | 2009-10-07 |
| 发明(设计)人: | S·里博;F·奥利维利;H·米德尔;D·莱曼;S·拉沃尔德 | 申请(专利权)人: | 米利波尔公司 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N15/10 |
| 代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林晓红 |
| 地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 检测 膜上活 细胞 包含 nog hmp 氯化 氯化锂 组合 | ||
1.细胞透化组合物,其可用于使荧光标记物渗透进入细胞同时保持所 述细胞的活力,其特征在于所述组合物包含:
a)终浓度(重量/体积)至少为0.01%的N-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷;
b)终浓度(重量/体积)至少为0.1%的多聚磷酸钠;以及
c)终浓度(摩尔每升)至少为1mmol.l-1的氯化铷和/或氯化锂。
2.如权利要求1所述的组合物,其特征在于所述组合物包含氯化锂。
3.如权利要求1所述的组合物,其特征在于所述组合物包含氯化铷。
4.如权利要求1所述的组合物,其特征在于所述组合物包含氯化锂和氯 化铷的混合物。
5.如权利要求1所述的组合物,其特征在于多聚磷酸钠在所述组合物中 的终浓度(重量/体积)位于0.1%到2%之间。
6.如权利要求5所述的组合物,其特征在于多聚磷酸钠在所述组合物中 的终浓度(重量/体积)位于1%到2%之间。
7.如权利要求1所述的组合物,其特征在于N-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷的 终浓度(重量/体积)位于0.03到0.2%之间。
8.如权利要求1所述的组合物,其特征在于氯化铷的终浓度位于1到20 mmol.l-1之间。
9.如权利要求8所述的组合物,其特征在于氯化铷的终浓度位于10到15 mmol.l-1之间。
10.如权利要求1-9任一项所述的组合物,其特征在于所述组合物包含 氯化锂和氯化铷的混合物,其中氯化锂和氯化铷的比率为50-200。
11.如权利要求1所述的组合物,其特征在于其是配制于水或MOPS、 MES或HEPES缓冲液的溶液。
12.如权利要求1所述的组合物,其特征在于所述组合物不包含PBS 缓冲液。
13.如权利要求1的组合物,其特征在于所述组合物还包含至少一种 荧光标记物。
14.如权利要求13所述的组合物,其特征在于所述荧光标记物是荧光 探针。
15.如权利要求13所述的组合物,其特征在于所述荧光标记物是荧光 化合物。
16.如权利要求15所述的组合物,其特征在于所述荧光化合物选自: FDA、6-CFDA、5-CFDA、5-马来酰亚胺FDA、荧光素二月桂酸酯、荧光素 二丁酸酯、5(6)-2′,7′-二氯-CFDA、5(6)-磺基-FDA、5(6)-2′,7′-二氯-FDA、荧 光素二丙酸酯、二-β-D-半乳糖苷荧光素、3-O-甲基荧光素磷酸酯、2′,7′-双(羧 乙基)-5(6)-羧基-荧光素的五乙酰氧基酯、叠氮荧光素二乙酸酯、氯甲基荧 光素二乙酸酯、四溴荧光素二乙酸酯、羧基四溴荧光素二乙酸酯、4-甲基伞 形酮乙酸酯、4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷、4-甲基伞形酮-α-D-吡喃甘露糖 苷、4-甲基伞形酮壬酸酯、4-甲基伞形酮磷酸酯、丙氨酸-7-氨基-4-甲基香 豆素、甘氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素、脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素、缬氨酸 -7-氨基-4-甲基香豆素、甘氨酰-L-脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素、1,4-二乙酰 氧基-2,3-二氰苯、氢化乙啡啶、乙酸试卤灵。
17.如权利要求15所述的组合物,其特征在于所述荧光化合物是 CFDA或FDA或它们的衍生物。
18.权利要求1所述的透化组合物在细胞计数和/或鉴定方法中的应 用。
19.权利要求1所述的组合物在活细胞的荧光检测中的应用。
20.权利要求1所述的透化组合物在革兰氏阳性微生物或革兰氏阴性 微生物计数和/或鉴定方法中的应用。
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