[发明专利]一种新的检测血清样本中SARS抗体的方法和产品

权利要求书

1、一种采用蛋白悬浮芯片检测血清样品中SARS抗体的间接免疫学定量检测方法，其特征在于，检测过程中全部反应可在96孔滤板或者微量离心管中进行，该方法包括下列步骤：

(1)包被微球的捕获抗原为SARS-CoV N蛋白抗原；

(2)向孔内加入含已包被捕获抗原编码微球的工作溶液，用清洗液清洗；

(3)加入待测血清样品，孵育后清洗；

(4)加入用生物素化的检测抗体，孵育后清洗；

(5)加入链亲和素-藻红蛋白，孵育后清洗；

(6)加入检测缓冲液后混匀；

(7)用悬浮芯片系统读取平均荧光强度(MFI)数值并分析数据判定检测结果。

2、权利要求1的方法，其特征在于所述SARS-CoV N蛋白抗原为重组SARS-CoV全长核蛋白-N32(aa1-422)和重组SARS-CoV核蛋白片段N13(aa221-422)，均经镍亲和柱纯化。

3、如权利要求1所述的方法，其特征在于，采用生物素标记的羊抗人IgG作为检测抗体，并且其与SARS-CoV N蛋白的组合组成间接法检测体系。

4、如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的包被微球的捕获抗SARSN蛋白抗原用量为3-9μg/1.25×10⁶个编码微球或6～36ng/2500-5000个微球/测试。

5、如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中的标记检测抗体羊抗人IgG的生物素为羧基活性的生物素。

6、如权利要求1所述的方法，其特征在于，2mg/mL生物素化的检测抗体Bio-羊抗人IgG以1:2500稀释作为检测抗体进行检测。

7、一种定量检测血清样品中SARS抗体的蛋白悬浮芯片方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：

(1)加入的阳性检测样品或标准品经梯度倍比稀释，所述梯度倍比稀释为4倍；

(2)将系列稀释样品在悬浮芯片系统中检测读取对应荧光值(MFI)；

(3)制作样品浓度对应MFI值的剂量-反应曲线；

(4)用分析软件拟合剂量-反应曲线和方程；

(5)未知浓度样品可根据剂量-反应曲线和方程判断未知样本中SARS抗体的浓度。

8、一种采用检测血清样品中SARS抗体的蛋白悬浮芯片，该芯片包括：编码微球，作为包被微球抗原的SARS-CoV N蛋白抗原，生物素标记的羊抗兔IgG和羊抗人IgG作为检测抗体，链亲和素-藻红蛋白和适宜的缓冲溶液。