[发明专利]RGDfK修饰的冬凌草甲素聚乳酸载药纳米粒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于化学制药领域，具体地说，涉及RGDFK修饰的冬凌草甲素聚乳酸载药纳米粒及其制备方法。

背景技术

在纳米粒(nanoparticles，NP)表面进行修饰，连接特定的配基，通过配体-受体相互作用，使纳米粒与靶部位表达的受体特异性结合，可以达到主动靶向。常用的配体、受体等包括特定的表面活性剂、糖类、叶酸、低密度脂蛋白受体、尿激酶受体、肿瘤坏死因子受体家族、转铁蛋白和多肽等。目前研究较多的多肽类介导的靶向给药系统多为单抗、转铁蛋白、谷胱甘肽、RGD多肽及其类似物等。其中RGD多肽及其类似物作为肿瘤靶向介导的配体是近年研究的热点领域。

整合素(integrin)是一类细胞膜表面糖蛋白受体家族分子，由a、β两个亚基通过非共价键连接而成的异二聚体蛋白质，主要介导细胞与细胞之间及细胞与细胞外间质(ECM)之间的黏附。目前研究发现受体家族包括至少18个a亚单位和9个β亚单位，共同组成超过25种不同的整合素。a、β两种亚基均由长的胞外段(氨基端)、跨膜段、短的胞内段(羧基端)三部分组成。a亚基的胞外段识别ECM的RGD序列(Arg-Gly-Asp，精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)介导细胞与ECM之间的黏附；β亚基的胞内段与细胞骨架相连。整合素参与构成的ECM，广泛影响细胞的生长、生存、增殖、分化、侵袭和转移等生物学行为。

整合素在肿瘤血管新生的过程中起着不可缺少的作用。在体外和体内实验中，a₁β₁、a₂β₁、a_vβ₃、a_vβ₅整合素均影响血管生成。a_vβ₃整合素的作用最为重要且研究最多。a_vβ₃在肿瘤血管生成中的作用主要表现在：参与内皮细胞的激活和迁移、介导内皮细胞增殖、抑制内皮细胞凋亡、参与bFGF诱导的血管生成、参与VEGF诱导的血管生成、诱导环加氧酶的产生等。

整合素主要是通过识别配体分子中特定的氨基酸短肽序列“精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸”(RGD)而介导细胞的各种生理作用。RGD序列是多种生物细胞外基质和血浆蛋白结构中常见的基本成分，也是广泛存在于细胞间识别系统的基本单位，能与细胞表面整合素特异性结合，从而介导许多重要的生命活动。外源性RGD肽可与体内含RGD序列的物质竞争结合，从而竞争性抑制RGD-整合素介导的各种生命活动。

研究证明，整合素家族中a_vβ₃的配体即含有RGD序列的多肽及其类似物对肿瘤血管内皮细胞的粘附和迁移有明显的抑制作用；RGD肽还可诱导肿瘤细胞中caspase-3和caspase-7表达的增高，从而促进肿瘤细胞的凋亡。整合素a_vβ₃在多种肿瘤细胞表面和新生血管内皮细胞上有高表达，但在成熟血管内皮细胞和绝大多数正常器官系统中a_vβ₃不表达或者很少量的表达。因此，a_vβ₃是理想的肿瘤靶向治疗靶点，其配体RGD肽可以作为靶向载体，携带效应分子，抑制肿瘤生长和新生血管的形成，使肿瘤组织供养系统中断，细胞萎缩、凋亡。

RGD用于介导纳米给药系统的主动靶向和抗肿瘤研究，已成为近年来药物新型给药系统研究的前沿领域。

主动靶向给药系统通过载体结构修饰或生物识别作用将药物定向运送至病变部位发挥药效，而不损伤周围的正常细胞、组织和器官。在纳米粒表面进行修饰，连接特定的配基，通过配体一受体相互作用，使NP与靶部位表达的受体特异性结合，可达到主动靶向。常用的配体、受体等包括特定的表面活性剂、糖类、叶酸、低密度脂蛋白受体、尿激酶受体、肿瘤坏死因子受体家族、转铁蛋白和多肽等。多肽类物质多数源于内源性肽或其他天然肽，其具有活性高、剂量小、毒副作用低、代谢终产物为氨基酸等突出特点。其中RGD多肽及其类似物是近几年国际上研究较为热点的领域。