[发明专利]纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法

权利要求书

1、一种纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

第一步，将收割后的稻草洗净、切断，干燥至恒重，在纤维素酶水解前，将切好的稻草用碱进行处理；

第二步，将处理后的稻草用里氏木霉ZM4-F3进行水解产糖培养，用以产生还原糖；

第三步，然后将培养至对数生长期的铜绿假单胞菌BSZ-07接种到第二步的稻草水解体系中，实现鼠李糖脂类表面活性剂的在线生产，促进纤维素酶的水解。

2、根据权利要求1所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述将收割后的稻草洗净、切断，干燥至恒重，是指：将收割后的稻草用自来水冲洗4-5遍以去除杂质以及茎结，并切至1-2cm的小段，切好的稻草置于70℃烘箱中干燥至恒重，在室温下储存。

3、根据权利要求1所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述将剪切好的稻草用碱进行处理，是指：将10g剪好的稻草置于40ml 2％体积浓度的氢氧化钠中，保持固液体质量比为1∶4，85℃水浴1h，用蒸馏水洗至中性，置于70℃烘箱中干燥至恒重。

4、根据权利要求1所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述用里氏木霉ZM4-F3进行水解产糖培养，是在30℃、200rpm摇床中进行。

5、根据权利要求1或4所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述用里氏木霉ZM4-F3进行水解产糖培养，采用的培养基的成份为：稻草3g，麸皮1g，Mandels微量元素盐溶液0.5mL，营养盐10mL，蛋白胨0.1g，用蒸馏水定容至100mL，pH值调至4.8。

6、根据权利要求5所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述营养盐中组分质量浓度：磷酸二氢钾0.4％，硫酸铵1.6％，硫酸镁0.1％，蒸馏水97.9％。

7、根据权利要求1所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述第三步，具体为：将铜绿假单胞菌BSZ-07溶于50mL种子培养基中以制备种子悬液，保持密度为10⁶孢子/mL；然后，取菌株的种子悬液5mL，接种到100mL发酵产表面活性剂培养基中，35℃、200r/min摇床中振荡培养24h至对数生长期；将2-6mL处于对数生长期的铜绿假单胞菌BSZ-07种子液接种到稻草水解体系中，其中稻草水解体系的体积为100mL，菌种在35℃、200r/min摇床中培养48h，用于稻草水解。

8、根据权利要求7所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述种子培养基成份为：牛肉膏3g，NaNO₃ 1g，(NH₄)₂SO₄1g，Na₂HPO₄ 1.2g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.01g，CaCl₂ 0.002g，水1000mL，pH 6.5-7.0。

9、根据权利要求7所述的纤维素酶水解中鼠李糖脂生物表面活性剂的在线生产方法，其特征是，所述发酵产生物表面活性剂培养基的成份为：葡萄糖2g，酵母膏0.1g，NH₄NO₃ 0.5g，机油2mL，KH₂PO₄ 1g，Na₂HPO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O0.02g，微量元素溶液0.5mL，水1000mL。