[发明专利]一种从金银花中提取分离绿原酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体地说是一种从金银花中提取分离绿原酸单体的方法。该方法所分离的绿原酸单体含量达到98.0％以上。

背景技术

金银花，又名二花、双花、金花、银花和忍冬花，属忍冬科忍冬属。据文献记载：我国是金银花的原产地之一，距今2200多年前的秦汉时期的《神农本草经》称其为忍冬。明朝李时珍在他的《本草纲目》中对金银花的名称、形态和特征等做出了详细介绍，其具味甘性寒，功能清热解毒，疏散风热。随着现代化学和药理的研究，其主要有效成分已基本清楚，但其主要成分之一绿原酸(Chlorogenic acid，C₁₆H₁₈O₉，CAS^#：327-97-9)，市售产品多从植物杜仲里边提取，而且所含杂质较多，从金银花中提取分离绿原酸尚未形成大规模商业化的生产。绿原酸结构式如下：

邓良等有报道绿原酸是一种酚型抗氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿魏酸、丁香酸等；绿原酸还能够抑制突变和抗肿瘤，对于创伤的治愈、皮肤健康湿润、润滑关节、防止炎症都有一定的效果。另外，绿原酸还对多种致病菌和病毒有较强的抑制和杀灭作用。因此，绿原酸单体的分离提取对于中药的新药开发具有重要价值。

韩鲁加等报道了金银花中绿原酸的提取纯化方法(CN01144170.4)，是采用稀乙醇对金银花进行二次回流提取，浓缩提取物再用絮凝发初步除杂纯化，最后采用大孔树脂或酸性乙酸乙酯法萃取纯化精制。但是，该法所得的绿原酸纯度低于84％，实际为含绿原酸的金银花提取物，而非单体。

陈福明报道了一种由金银花粗提物制备高纯度绿原酸的方法(CN200510105658.X)，是将金银花粗提物醇沉过滤、逆流萃取、浓缩、配制水相、柱析、收集解吸液，结晶干燥，得到绿原酸含量50～92％的产品。但是该方法制备的绿原酸纯度较低，最高仅能达到92％，且层析柱不适合商业化工业生产，实用意义不大。

毕思彬等报道了金银花高纯度绿原酸提取工艺(CN200510020080.8)，在金银花高纯度绿原酸提取工艺的β-CD络合工艺中加入环己酮解络、转型和制备高纯度绿原酸。虽然该方法所得绿原酸含量≥95％。但同样为硅胶柱层析，而且所得纯度在95％左右，不适合商业化工业生产，实用意义不大。

因此，目前的现有技术中缺少适合大量制备，能够将金银花中的绿原酸提纯到98.0％以上方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种从金银花中提取分离绿原酸的方法，该方法使绿原酸含量达到98.0％以上。

本发明是采用如下技术方案实现的：

一种从金银花中提取分离绿原酸的方法，其特征是包括如下步骤：

(1)醇浸泡：将金银花置于醇溶液中浸泡，加热回流3次，每次1-3小时，过滤，滤液浓缩，加水，冷藏12小时以上，过滤，滤液减压浓缩；

(2)脱脂：(1)步所得滤液采用弱极性溶剂脱脂三次，取水层；

(3)上大孔树脂富集：(2)步所得水溶液通过大孔树脂，水洗，收集流出液及水洗液，浓缩，冷却至室温，稀无机酸调节pH值至1.8-2.21；

(4)萃取：采用中等极性溶剂萃取(3)步所得，萃取3次，取有机层，浓缩回收溶剂，得到淡黄色蓬松固体物；

(5)重结晶：向(4)步所得蓬松固体物中加入适量乙酸乙酯，加热至溶解，加入活性炭，过滤，回收乙酸乙酯，即可得到绿原酸单体。

上述从金银花中提取分离绿原酸的方法中，所述步骤(1)醇溶液是低碳链醇中的一种或几种，低碳链醇是指甲醇、乙醇，浓度在30～95％，金银花与醇溶液重量体积比为1∶1～15，较优比例为1∶1～12。

所述步骤(2)脱脂采用的弱极性溶剂是指低碳链的醚、低碳链的酯；低碳链的醚是乙醚、石油醚，低碳链的酯是丁酯，弱极性溶剂与提取液体积比为1∶0.1～20，较好比例为1∶1～10。

所述步骤(3)中1mL大孔树脂除杂处理提取液中所含提取物相当于生药量为0.1～0.5克。大孔树脂为弱极性大孔树脂D101、D101B、X-5中的一种或几种；金银花与树脂重量体积比例为1∶2～5；稀无机酸是指浓度为1％～30％的盐酸、硫酸、磷酸。

所述步骤(4)萃取所用的中等极性的有机溶剂是低碳链的醇、低碳链的酯，或低碳链的醇、酯混合物；低碳链的醇是指C_3-5的醇，如丙醇、丁醇、戊醇，低碳链的酯是指C_3-6的酯，如甲酸甲酯、乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丁酯。