[发明专利]淡水芦苇非愈伤组织培养方法有效
| 申请号: | 200910025664.2 | 申请日: | 2009-03-05 |
| 公开(公告)号: | CN101491213A | 公开(公告)日: | 2009-07-29 |
| 发明(设计)人: | 安树青;孙一香;清华;孙利芳;庄瑶;陆霞梅 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南京知识律师事务所 | 代理人: | 胡锡瑜 |
| 地址: | 210097*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淡水 芦苇 非愈伤 组织培养 方法 | ||
1.一种淡水芦苇非愈伤组织培养方法,其特征在于用生长高大的芦苇的茎段进行非愈伤组织培养,快速繁殖出完整芦苇苗,由以下步骤构成:
(1)将采自野外的芦苇茎段剪成小段,每段2-3cm长,在蒸馏水下洗净,然后在超净台上用70%乙醇浸泡30s,用蒸馏水涮洗2-3次后用0.1%HgCl2水溶液消毒5min,再用无菌蒸馏水洗涤4-5次;
(2)将消毒后的芦苇茎段接种到诱导培养基上诱导不定芽;诱导培养基为MS培养基+3%蔗糖+0.43%琼脂+BA6mg/L+NAA0.2mg/L+PVP 50mg/L;温度为25土2℃、光强为2000lx、每日光照14h;
(3)将产生的不定芽转移到继代培养基上进行继代培养;继代培养基为MS培养基+3%蔗糖+0.43%琼脂+BA5mg/L+NAA0.2mg/L+PVP 50mg/L;温度为25土2℃、光强为2000lx、每日光照14h;
(4)在生根培养基上诱根,产生完整试管苗;生根培养基为1/2MS培养基+3%蔗糖+0.43%琼脂+IBA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+PVP50mg/L;温度为25土2℃、光强为2000lx、每日光照14h;
(5)当试管苗根长2cm时,打开瓶口并加少量蒸馏水炼苗2-3d,然后将根部琼脂洗净,移入珍珠岩中过渡,3-5d后移入土壤。
2.根据权利要求1所述淡水芦苇非愈伤组织培养方法,其特征在于所有培养基的pH配制时调至6.1;所有培养基在高压灭菌锅中121℃灭菌20min,灭菌后的培养基放在超净台上1d后再用,以晾干水膜。
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