[发明专利]单克隆抗体及其方法

说明书

发明领域

本发明涉及人源化IgG1同种型抗-CD6抗体(T1h)，其与存在于胸腺上皮细胞、单核细胞、激活的T细胞和各种其他细胞类型表面上的CD6的清道夫受体富含半胱氨酸(SRCR)结构域1(D1)结合。本发明进一步涉及抑制T细胞增殖但不阻断CD6和原初CD6配体样激活白细胞粘附分子(ALCAM)相互作用的方法。本发明还涉及使用与CD6的SRCR结构域1(D1)结合的抗-CD6抗体治疗各种疾病适应症的方法。

发明背景

CD6是主要由人T细胞和B细胞亚群以及由一些B细胞慢性淋巴细胞性白血病和神经元表达的重要细胞表面蛋白[Aruffo等，J.Exp.Med.1991，174：949；Kamoun等，J.Immunol.1981，127：987；Mayer等，J.Neuroimmunol.1990.29：193]。CD6是特征在于具有至少一个与I型巨噬细胞的清道夫受体富含半胱氨酸结构域(SRCR)同源的蛋白质大家族的成员[Matsumoto等，J.Exp.Med.1991，173：55和Resnick等，Trends Biochem.Sci.1994，19-5]。这个家族的其他成员包括CD5[Jones等，Nature.1986，323：346]；亲环素C[Friedman 等，1993，PNAS 90：6815]；补体因子I，其结合激活的补体蛋白C3b和C4b[Goldberger等，J.Biol.Chem.1987，262：10065]；由.τ./.δ.T细胞表达的牛WC-1[Wijingaard等，J.Immunol.1992，149：3273]和M130[Law等，Eur J.Immunol.1993，23：2320]，一种巨噬细胞激活标记。

使用抗-CD6单克隆抗体(mAb)的阻断研究表明CD6通过调节T细胞与胸腺上皮(TE)细胞的粘附相互作用在T细胞发育中起着重要作用[Patel等，J.Exp.Med.1995 181：1563-1568]。其他研究已经表明CD6在T细胞激活中可以作为重要的辅助分子来起作用。例如，某些抗-CD6 mAb对于T细胞是直接致有丝分裂的[Gangemi等，J.Immunol.1989，143：2439和Bott等，1993 Int.Immunol，7：783]，而其他能够和抗-CD3、抗-CD2或佛波醇12肉豆蔻酸酯13醋酸酯(PMA)一道共同刺激T细胞增殖[Gangemi等，J.Immunol.1989，143：2439；Morimoto等，J.Immunol.1988，140；2165-2170；和Osorio等，Cell.Immunol.1994，154：23]。CD6在T细胞激活中的作用的其他证据来自表明在T细胞激活后CD6对Ser和Thr残基变得超磷酸化[Swack等，Mol Immunol 1989 26：1037-1049和J.Biol.Chem.1991，266：7137；Cardenas等，J.Immunol.1990，145：1450-1455]和对Tyr残基变得磷酸化[Wee等，J.Exp.Med.1993，177：219-223]的研究。这些和其他研究暗示CD6是体内未成熟和成熟T细胞功能的重要调节剂，影响T细胞激活和信号转导。

成熟CD6蛋白的胞外结构域由三个SRCR结构域(下文中称为D1、D2和D3)组成。D3对应于膜近端SRCR结构域，其后为短的33-氨基酸的茎区。这些胞外结构域通过后面为可变长度的胞质结构域的短跨膜结构域锚定于细胞膜上[Aruffo等，J.Exp.Med.1991，174：949]。

使用CD6-免疫球蛋白融合蛋白(含有与人IgG₁恒定区融合的选定的CD6胞外结构域(CD6-Rgs)的研究，导致CD6配体的鉴定和克隆，该配体被称为“激活的白细胞粘附分子”(ALCAM)[Wee等，Cell Immunol1994，158：353-364；Patel等，J.Exp.Med.1995.181：1563-1568；Bowen等，J.Exp.Med.1995，181：2213-2220]。ALCAM与对应于膜近端SRCR结构域的CD6的结构域3结合[Whitney等，J.Biol.Chem.1995，270：18187-18190]。