[发明专利]具有HER2亲和性的新多肽

说明书

发明领域

本发明涉及结合人表皮生长因子受体2(在后文称作HER2)的新多肽。本发明还涉及这种HER2结合多肽作为诊断剂和/或药物的应用，特别是其作为诊断和/或治疗特征在于HER2过表达的癌症的诊断剂和/或药物的应用。

背景

HER2及其在癌症疾病中的作用

HER2原癌基因编码已知产生称作HER2蛋白或者受体的185kDa细胞表面受体蛋白(Hynes NE et al(1994)Biochim Biophys Acta 1198：165-184)。这个基因有时也称作neu、HER2/neu或者c-erbB-2。Neu首先在已经用乙基亚硝基脲治疗的大鼠中发现，并表现为这个基因突变(Shih C et al(1981)Nature 290：261-264)。突变形式的neu导致组成型活性形式的受体产生，且组成可在低拷贝数转化细胞的强力致癌基因(Hynes NE et al，supra)。

正常细胞以组织特异性方式在其浆膜上表达少量HER2蛋白。目前没有已知的HER2配体；然而，HER2已经示出与HER1(表皮生长因子受体，EGFR)、HER3和HER4形成异源二聚体，与这些受体的配体复合。这种异源二聚体形成使得激活的HER2受体从细胞外部向细胞核传递生长信号，因此控制正常细胞生长和分化(Sundaresan S et al(1999)Curr Oncol Rep 1：16-22)。

在肿瘤细胞中，DNA复制系统中的错误可导致一个染色体上存在多个基因拷贝，这是已知称作基因扩增的现象。HER2基因的扩增导致这个基因的转录增加。这样提高了HER2 mRNA水平及增加伴随的HER2蛋白合成增加，由此导致HER2蛋白在这些肿瘤细胞表面上过表达。这种过表达可导致HER2蛋白水平与在相邻的正常细胞中的发现的那些表达水平高10-100倍。由此导致细胞分化增加及伴随的较高的细胞生长速度。HER2基因的扩增参与正常细胞转化为癌症表型(Hynes NE et al，supra；Sundaresan S et al，supra)。

据认为HER2蛋白的过表达导致HER2的同源二聚体形成，这导致组成型活性受体形成(Sliwkowski MX et al(1999)Semin Oncol 26(4 Suppl 12)：60-70)。在这些条件下，生长促进信号在不存在配体的情况下可以持续地传递进细胞中。因此，多个细胞内信号转导途径被激活，导致不受控制的细胞生长，以及在一些情况中出现致癌转化(Hynes NE et al，supra)。因此，由生长因子受体介导的信号转导机制是抑制细胞复制和肿瘤生长的重要靶位。

乳腺癌在美国是女性最常见的恶性肿瘤，在2001年新增病例已经是192200例(Greenlee R et al(2001)CA Cancer J Clin 51：15-36)。在大约25％的所有乳腺癌患者中，均存在HER2基因由于其扩增而过表达(Slamon DJ et al(1989)Science 244：707-712)。HER2蛋白的这种过表达与一些阴性预后变量相关，包括雌激素受体阴性状态、高S-期细胞比值(high S-phase fraction)、阳性淋巴结转移(positive nodal status)、突变的p53以及高核级别(high nuclear grade)(Sjogren S et al(1998)J Clin Oncol 16(2)：462-469)。根据Slamon等(如前)所述，发现HER2基因的扩增与淋巴结阳性转移患者的缩短的无疾病存活期和缩短的整体存活期明显相关。

为此，重要的目标是继续进一步研究HER2在乳腺癌的发病机制和治疗中的作用。与HER2相互作用的分子的鉴别是这项研究的一部分。

临床前体外研究检验了HER2活性抑制是否能影响肿瘤细胞生长。用4D5，一些鼠抗HER2单克隆抗体之一，治疗过表达HER2蛋白的SK-BR-3乳腺癌细胞，与用对照的单克隆抗体治疗相比，确实抑制肿瘤细胞增殖。给予具有过表达HER2的人乳腺癌和卵巢癌(异种移植)的小鼠4D5延长其无肿瘤存活时间。相似的研究证实在小鼠中人胃癌异种移植物的生长被抗-HER2单克隆抗体抑制(Pietras RJ et al(1994)Oncogene 9：1829-1838)。