[发明专利]用于自动预处理糖链的仪器

权利要求书

1.用于分析样品中的糖链的方法，该方法包括下列步骤：

A)释放样品中的糖链的糖链释放步骤，该步骤包括下列步骤：

A-1)将样品提供在用于反应的板子上的步骤；

A-2)添加增溶剂到样品中然后将样品置于反应条件下的步骤；

A-3)添加还原剂到样品中然后将样品置于反应条件下的步骤；

A-4)添加-SH保护剂到样品中然后将样品置于反应条件下的步骤；

A-5)添加蛋白水解酶到样品中然后将样品置于反应条件下的步骤；

A-6)灭活蛋白水解酶的步骤；和

A-7)添加糖链释放酶到样品中从而释放糖链的步骤；

B)制备在检测中使用的释放的糖链的检测样品制备步骤，该步骤包括下列步骤：

B-1)使步骤(A)中制备的样品与糖链捕获珠子接触，然后将样品置于使样品中释放的糖链结合至所述珠子的条件下，并由此产生捕获的糖链样品的步骤；

B-2)添加蛋白变性剂到捕获的糖链样品中然后将捕获的糖链样品置于反应条件下的步骤；

B-3)洗涤捕获的糖链样品，然后通过抽吸除去残留的洗涤液体的步骤；

B-4)添加珠子上的糖链捕获剂的盐释放剂到捕获的糖链样品中，然后通过抽吸除去盐释放剂的步骤；

B-5)添加保护剂到捕获的糖链样品中然后将捕获的糖链样品置于反应条件下的步骤；

B-6)添加酸到捕获的糖链样品中，并通过抽吸除去酸的步骤；

B-7)添加有机反应溶剂到捕获的糖链样品中的步骤；

B-8)除去珠子中的溶剂和水分的步骤；

B-9)添加烷基酯化剂到捕获的糖链样品中然后将捕获的糖链样品置于反应条件下，并将唾液酸的羧酸烷基化的步骤；

B-10)添加有机反应溶剂到捕获的糖链样品中，并通过抽吸除去有机反应溶剂的步骤；

B-11)洗涤捕获的糖链样品，然后通过抽吸除去残留的洗涤液体的步骤；

B-12)从捕获的糖链样品中释放糖链样品的步骤，其中当进行分析所需要的标记时，将捕获的糖链样品中的糖链用标记试剂标记并将其从珠子释放；和

B-13)溶解释放的糖链样品以产生糖链样品溶液的步骤；

C)当使用板子进行质谱法分析时，制备具有点样于其上的捕获的糖链样品的用于质谱测试的板子的步骤，该步骤包括：

C-1)在用于回收的板子上处理步骤(B)中得到的标记的糖链样品溶液的步骤；并且该步骤还任选包括步骤(C-2)至(C-6)：

C-2)在用于混合的板子上处理来自用于回收的板子上的标记的糖链样品溶液和有机溶剂以得到糖链吸附至固相的在有机溶剂中的浓度的步骤；

C-3)提供附着有固相载体的板子的步骤；

C-4)根据附着有固相载体的板子的相，活化附着有固相载体的板子并洗涤该附着有固相载体的板子的步骤；

C-5)添加标记的糖链样品溶液至附着有固相载体的板子，并使标记的糖链样品溶液顺应具有适合于附着有固相载体的板子的相的极性的溶剂的步骤；

C-6)通过抽吸从附着有固相载体的板子回收标记的糖链样品溶液至第二个用于回收的板子的步骤；和

当将标记的糖链样品溶液进行MALDI-TOF MS时，包括下列步骤(C-7)：

C-7)将标记的糖链样品溶液与用于质谱测试的基质混合，并将该混合物点样于用于测试的板子上的步骤；和

D)对待测试的糖链进行分析的步骤。