[发明专利]具有乙酰木聚糖酯酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸

权利要求书

1.具有乙酰木聚糖酯酶活性的分离的多肽，其选自下组：

(a)多肽，其包含与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有优选至少80％，更优选至少85％，甚至更优选至少90％，并且最优选至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一性的氨基酸序列；

(b)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在优选至少高严紧条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，(ii)包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)由如下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有优选至少85％，更优选至少90％，并且最优选至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，或至少99％同一性的核苷酸序列；和

(d)变体，其包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的SEQID NO：2的成熟多肽。

2.权利要求1的多肽，其包含或其组成为：SEQ ID NO：2的氨基酸序列；或其具有乙酰木聚糖酯酶活性的片段。

3.权利要求1的多肽，其由如下多核苷酸编码，所述多核苷酸包含或其组成为：SEQ ID NO：1的核苷酸序列或其编码具有乙酰木聚糖酯酶活性的片段的亚序列。

4.权利要求1的多肽，其由大肠杆菌NRRL B-50067中所含质粒pTterAxe2A中含有的多核苷酸编码。

5.分离的多核苷酸，其包含编码权利要求1-4中任一项的多肽的核苷酸序列。

6.核酸构建体，其包含权利要求5的多核苷酸，该多核苷酸与指导所述多肽在表达宿主中产生的一个或多个调控序列可操作地连接。

7.重组宿主细胞，其包含权利要求6的核酸构建体。

8.产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，包括：(a)在有益于产生所述多肽的条件下培养细胞，所述细胞以其野生型形式产生所述多肽；和(b)回收所述多肽。

9.产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，包括：(a)在有益于产生所述多肽的条件下培养包含核酸构建体的宿主细胞，所述核酸构建体包含编码所述多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

10.产生亲本细胞的突变体的方法，包括破坏或缺失编码权利要求1-4中任一项的多肽的核苷酸序列，其导致所述突变体产生的所述多肽少于亲本细胞。

11.产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法，包括：(a)在有益于产生所述多肽的条件下培养转基因植物或植物细胞，所述转基因植物或植物细胞包含编码所述多肽的多核苷酸；和(b)回收所述多肽。

12.用编码权利要求1-4中任一项的多肽的多核苷酸转化的转基因植物、植物部分或植物细胞。

13.双链抑制性RNA(dsRNA)分子，其包含权利要求5的多核苷酸的亚序列，其中任选地所述dsRNA是siRNA或miRNA分子。

14.抑制细胞中多肽表达的方法，包括向所述细胞施用或在所述细胞中表达权利要求13的双链RNA(dsRNA)分子。

15.核酸构建体，其包含编码蛋白质的基因，该基因与编码信号肽的核苷酸序列可操作地连接，所述信号肽包含SEQ ID NO：2的氨基酸1-16或由SEQ ID NO：2的氨基酸1-16组成，其中所述基因对于所述核苷酸序列是外源的。

16.重组宿主细胞，其包含权利要求15的核酸构建体。

17.产生蛋白质的方法，包括：(a)在有益于产生所述蛋白质的条件下培养权利要求16的重组宿主细胞；和(b)回收所述蛋白质。

18.用于降解乙酰化木聚糖的方法，包括用包含有效量的具有权利要求1-4中任一项的乙酰木聚糖酯酶活性的多肽的组合物处理包含乙酰化木聚糖的材料。

19.权利要求18的方法，其中所述组合物还包含一种或多种(几种)木聚糖降解酶。

20.权利要求19的方法，其中所述一种或多种(几种)木聚糖降解酶选自下组：木聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、木糖苷酶和葡糖醛酸糖苷酶。