[发明专利]血红素蛋白的稳定化方法和保存溶液

说明书

技术领域

本发明涉及血红素蛋白的稳定化方法，特别是涉及在粪便、尿或血液样品中检查血红素蛋白时的血红素蛋白的稳定化方法。 

背景技术

近年来，作为大肠癌等消化系统疾病的筛查方法，广泛应用检测消化器官出血引起的粪便中的人血红蛋白(便潜血)的方法。这种人血红蛋白的检测方法是利用人血红蛋白的特异性抗体的免疫学方法，取代了以往的基于化学显色反应的试纸法，作为不需要限制饮食的简便检查方法而固定下来。 

作为人血红蛋白的免疫学检测法，可列举例如：在琼脂平板内利用由抗人血红蛋白抗体与被检样品中的人血红蛋白形成的沉淀线的单向免疫扩散法、采用以抗人血红蛋白抗体进行了敏化的胶乳粒子的胶乳凝集法、采用以酶或放射性元素标记的抗人血红蛋白抗体的酶免疫法或放射性免疫法、采用以抗人血红蛋白抗体进行了敏化的胶体金粒子的胶体金凝集比色法等。 

然而，人血红蛋白具有在被检液中逐渐变性、抗原性降低这样的性质。此外，被检液中的人血红蛋白往往由于保存温度等保存条件而加速变性、或被粪便中的细菌和/或消化酶分解。这样的变性·分解的结果是人血红蛋白的立体结构被破坏而导致抗原性降低。因此，在人血红蛋白的免疫学测定方法中，血红蛋白变性·分解会导致错误的诊断结果。 

另一方面，在便潜血检查中，通常是将被验者自身在自己家等采集的粪便溶解在包含粪便溶解液的密闭容器中以供检查。在该情况下，粪便中 的人血红蛋白往往在溶液中放置数天，或由于利用邮政等运输方式而置于高温下。此外，即使在检查机构采集粪便的情况下，也有时由于检查其它项目，而在便潜血的检查之前需要大量时间。在这样的状况下，如前所述，由于人血红蛋白发生变性·分解，因此妨碍高准确度的测定。 

为了防止这种溶液中的人血红蛋白的变性·分解，提出了例如：添加乙基汞硫代水杨酸钠和/或氯己定等常用抗菌剂的方法(例如参照专利文献1)，以及添加糖类的方法(例如参照专利文献2)、添加除人以外的动物血红蛋白(例如参照专利文献3)、添加除人以外的动物血清(例如参照专利文献4)、添加溶菌酶(例如参照专利文献5)、添加原卟啉铁(例如参照专利文献6)等。 

然而，在这些公报中记载的人血红蛋白稳定化技术不能充分抑制包含粪便的被检液中的人血红蛋白变性·分解。 

除此以外，还提出了采用乙二胺四乙酸(以下省略为EDTA)的血红蛋白稳定化方法(例如参照专利文献7)。 

然而，本发明者们进行补充试验的结果证实，不能期待通过单独使用EDTA而对粪便中的血红蛋白产生充分的稳定化作用。 

因此，本申请人提出了比单独使用EDTA稳定化效果更好的、添加水溶性过渡金属配合物的方法(例如参照专利文献8)。此外，本申请人已经提出了下述方法：使其与亚铁氰化物共存的血红蛋白的稳定化方法(例如参照专利文献9)、共存血红蛋白的酶分解产物的血红蛋白的稳定化方法(例如参照专利文献10)、共存过渡金属类的血红素蛋白的稳定化方法(例如参照专利文献11)、共存苹果酸等有机酸的血红素蛋白的稳定化方法(例如参照专利文献12)和共存脱脂白蛋白的血红素蛋白的稳定化方法(例如参照专利文献13)。 

专利文献1：特开昭63-271160号公报 

专利文献2：特开昭63-243756号公报 

专利文献3：特开平2-296149号公报 

专利文献4：特开平4-145366号公报 

专利文献5：特公平5-69466号公报 

专利文献6：特开平5-281227号公报 

专利文献7：特开平5-99923号公报 

专利文献8：特开平7-229902号公报 

专利文献9：特开平11-118806号公报 

专利文献10：特开平11-218533号公报 

专利文献11：特开2001-249132号公报 

专利文献12：特开2003-014768号公报 

专利文献13：特开2003-194825号公报 

发明内容

本发明的第一课题是提供对以血红蛋白为代表的血红素蛋白的变性·分解作用有效的新的血红素蛋白的稳定化方法。目的是提供使特别是与变性·分解作用强的粪便成分共存的血红蛋白有效地稳定化的技术。 

本发明的第二课题是提供利用了新的血红素蛋白的稳定化剂的血红素蛋白的保存溶液。