[发明专利]生产促卵泡激素的细胞克隆有效
| 申请号: | 200880022358.7 | 申请日: | 2008-06-27 |
| 公开(公告)号: | CN101720332A | 公开(公告)日: | 2010-06-02 |
| 发明(设计)人: | S·阿诺德;N·耶利内克 | 申请(专利权)人: | 拜奥吉耐里克斯股份公司 |
| 主分类号: | C07K14/59 | 分类号: | C07K14/59 |
| 代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
| 地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生产 卵泡 激素 细胞 克隆 | ||
1.编码根据SEQ ID NO:6的人促卵泡激素β链的核酸分子,其编码区为根据SEQ ID No.1的核酸序列的编码区。
2.质粒载体或病毒载体,其包含根据权利要求1所述的核酸分子作为第一核酸序列,所述核酸分子在于宿主细胞中有活性的启动子的控制下。
3.根据权利要求2的质粒载体或病毒载体,还包含第二核酸序列,其编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素α链,该核酸序列为根据SEQ ID No.2的核酸序列的编码区。
4.根据权利要求2的质粒载体或病毒载体,还包含第二核酸序列,其编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素α链并且与SEQ ID No.2所示的核酸序列的编码区有至少85%的序列同一性。
5.根据权利要求2的质粒载体或病毒载体,还包含第二核酸序列,该核酸序列为根据SEQ ID No.3的核酸序列的编码区,其中第二核酸序列编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素的α链。
6.根据权利要求2的质粒载体或病毒载体,还包含第二核酸序列,该核酸序列与SEQ ID No.3中所示的核酸序列的编码区有至少70%的序列同一性,其中第二核酸序列编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素的α链。
7.根据权利要求3-6的任一项的质粒载体或病毒载体,其中第二核酸序列在分开的启动子的控制下。
8.根据权利要求2的质粒载体或病毒载体,其中第一核酸序列在病毒启动子的控制下。
9.根据权利要求3-6的任一项的质粒载体或病毒载体,其中第一核酸序列和/或第二核酸序列在病毒启动子的控制下。
10.根据权利要求8的质粒载体或病毒载体,其中第一核酸序列是在SV40启动子的控制下。
11.根据权利要求9的质粒载体或病毒载体,其中第一核酸序列是在SV40启动子的控制下。
12.根据权利要求9的质粒载体或病毒载体,其中第二核酸序列是在CMV启动子的控制下。
13.由SEQ ID No.7中描述的核酸序列组成的重组核酸分子。
14.宿主细胞,其包含根据权利要求3到12任一项的质粒载体或病毒载体或根据权利要求13的重组核酸分子。
15.根据权利要求14的宿主细胞,其为哺乳动物细胞。
16.根据权利要求14或15的宿主细胞,其为中华仓鼠卵巢细胞。
17.根据权利要求14或15的宿主细胞,保藏号是DSM ACC2833。
18.宿主细胞,其包含根据权利要求2的质粒载体或病毒载体和第二质粒载体或病毒载体,该第二质粒载体或病毒载体包含这样的核酸序列,其编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素α链,该核酸序列选自根据SEQ ID NO:2的核酸序列的编码区和如SEQ ID No.3所示的核酸序列。
19.宿主细胞,其包含根据权利要求2的质粒载体或病毒载体和第二质粒载体或病毒载体,该第二质粒载体或病毒载体包含这样的核酸序列,其与SEQ ID No.2中所述的核酸序列的编码区有至少85%的序列同一性并且编码根据SEQ ID NO:5的人促卵泡激素α链。
20.细胞培养物,其包含在合适的培养基中的根据权利要求14到19任一项的宿主细胞。
21.生产重组人促卵泡激素的方法,其包含步骤有:
-在合适的培养基中培养根据权利要求14到19任一项的宿主细胞;和
-收取细胞培养的上清液。
22.根据权利要求21的方法,还包括从细胞培养上清液中纯化重组人促卵泡激素的步骤。
23.产生根据权利要求14到17任一项的宿主细胞的方法,包括在无血清的条件下用根据权利要求3到12任一项的质粒载体或病毒载体或根据权利要求13的重组核酸分子转染悬浮培养的细胞。
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