[发明专利]免疫原性组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含C4bp结构域和抗原的免疫原性病毒载体组合物和疫苗，并涉及其用于提供增强的T细胞应答的方法。

背景技术

疫苗接种已被证明是预防疾病(特别是感染性疾病)的最有效手段之一。大多数疫苗通过诱导针对相关病原体感染具有保护作用的抗体来起作用。然而，许多新疫苗靶向免疫系统的细胞免疫分支并通过诱导效应T细胞和记忆T细胞来起作用。这些可以靶向细胞内的病原体和肿瘤。目前正在开发可用于预防或治疗的许多新的诱导T细胞的疫苗。

通过疫苗接种来诱导T细胞可用于多种方面。除了降低疫苗接种者的患病风险以外，它们还可用于获得性转移操作中以降低这些细胞的受者感染或患病的风险。它们也可用于诊断。

日益广泛使用的诱导免疫应答的方法是将目的抗原或表位克隆到载体中。载体可以是质粒、细菌或病毒。质粒DNA疫苗正在蓬勃发展，多种病毒载体似乎也可用于疫苗接种。这包括痘病毒例如经修饰的安卡拉痘苗病毒(modified vaccinia virus Ankara，MVA)，禽疸病毒载体例如鸡痘病毒、金丝雀痘病毒和ALVAC，疱疹病毒载体(包括单纯疱疹病毒和CMV)，甲病毒和腺病毒。

可由改进载体靶向的疾病包括但不限于疟疾、结核病、HIV/AIDS、HCV、HBV、HSV、HPV、CMV、由荚膜细菌(如肺炎球菌)引起的疾病、寄生虫疾病(如利什曼病)以及多种肿瘤和癌症(如淋巴瘤、白血病、黑素瘤、肾癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌和结直肠癌)。

疟疾仍然是世界上对公众健康的最大挑战之一。每年，恶性疟原虫(plasmodium falciparum)感染影响了超过5亿人，导致1～2百万个体死亡^1，2。开发有效的疫苗仍然是安全且成本低廉地控制这种疾病的重要目标。

对疟疾感染血液阶段的免疫主要是由抗体介导的，其针对裂殖子表面抗原(包括裂殖子表面蛋白-1(MSP-1))等保护性应答的靶标^3，4。MSP-1被合成为190～230kDa的多肽，其在侵入红细胞过程中经历蛋白水解加工⁵。42kDa的C端(MSP-1₄₂)最终被切割成33kDa和19kDa的片段(分别称为MSP-1₃₃和MSP-1₁₉)，其中只有MSP-1₁₉仍与裂殖子表面结合⁶。MSP-1₄₂是血液阶段疟疾疫苗最重要的候选抗原，并能在小鼠和猴子中诱导保护性应答，这主要依赖于在感染疟疾时存在针对MSP-1₁₉的高效价抗体应答^7-9。针对MSP-1₃₃的抗体应答是非保护性的^10，11。

T细胞应答对血液阶段免疫的作用尚未阐明¹²。就MSP-1₄₂来说，已报道在多种疟原虫的MSP-1₃₃中具有CD4⁺T细胞的表位，这可能为针对MSP-1₁₉的保护性抗体应答提供T细胞协助^11，13。识别MSP-1₃₃(而非MSP-1₁₉)中表位的CD4⁺T细胞还能够控制过继转移有致命性约氏疟原虫(P.yoelii)的免疫缺陷小鼠的生长^14，15。在对半免疫儿童的研究中，已发现针对MSP-1的细胞应答与保护有关³，类似地，将小鼠或人类志愿者反复暴露于极低剂量的血液阶段寄生虫诱导了特征在于细胞应答而非抗体应答的保护性免疫^16，17。CD8⁺T细胞不参与约氏疟原虫模型中的血液阶段免疫¹⁸。然而，针对约氏疟原虫MSP-1的T细胞应答可以保护免受肝脏阶段寄生虫¹⁹，这是因为MSP-1在晚期红细胞外裂殖体中表达²⁰。因此，MSP-1是多阶段疫苗诱导免疫的靶标。