[发明专利]软骨细胞制备方法有效
| 申请号： | 200880002777.4 | 申请日： | 2008-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN101657536A | 公开（公告）日： | 2010-02-24 |
| 发明（设计）人： | 谷口英树;小林真司 | 申请（专利权）人： | 公立大学法人横浜市立大学 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00;A61P19/00;A61K35/32;C12N5/06 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人： | 朱 丹 |
| 地址： | 日本国*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 软骨 细胞 制备 方法 | ||
1.一种软骨细胞的制备方法，其中，
包括在含有DEME/F12、血清、抗生素、胰岛素样生长因子和/或碱性成纤维细胞生长因 子、以及抗真菌剂的培养基中且在体外使来自人软骨膜组织的最外层和/或成纤维细胞层 的人软骨膜细胞分化为软骨细胞的步骤，所述最外层表达I型胶原、且不表达II型胶原，并 且，所述成纤维细胞层表达I型胶原、且不表达II型胶原。
2.如权利要求1所述的方法，其中，
通过离心管培养人软骨膜细胞来形成细胞块。
3.如权利要求1所述的方法，其中，
利用平板培养将人软骨膜细胞重迭。
4.如权利要求1～3中任意一项所述的方法，其中，
血清为牛血清。
5.如权利要求1～3中任意一项所述的方法，其中，
血清为自身血清。
6.如权利要求1～3中任意一项所述的方法，其中，
培养基还含有地塞米松和/或L-抗坏血酸。
7.一种软骨细胞产生的基质的制备方法，
其包括在含有DEME/F12、血清、抗生素、胰岛素样生长因子和/或碱性成纤维细胞生长 因子、以及抗真菌剂的培养基中且在体外使来自人软骨膜组织的最外层和/或成纤维细胞 层的人软骨膜细胞分化为软骨细胞的步骤以及使该软骨细胞产生基质的步骤，
所述最外层表达I型胶原、且不表达II型胶原，所述成纤维细胞层表达I型胶原、且不表 达II型胶原。
8.如权利要求7所述的方法，其中，
所述基质为II型胶原和/或蛋白聚糖。
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