[发明专利]乳铁蛋白的亲和分离材料和乳铁蛋白的亲和纯化方法有效
| 申请号: | 200810200423.2 | 申请日: | 2008-09-25 |
| 公开(公告)号: | CN101362792A | 公开(公告)日: | 2009-02-11 |
| 发明(设计)人: | 李荣秀;文胜;任慧娟;霍晨晰;黄飞云 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
| 主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22 |
| 代理公司: | 上海交达专利事务所 | 代理人: | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址: | 200240*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 铁蛋白 亲和 分离 材料 纯化 方法 | ||
1.一种乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:
第一步,合成乳铁蛋白专一的亲和分离材料:首先以带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪反应活化,再与Beta-丙氨酸或1-氨基环己烷甲酸反应,合成仿生亲和分离材料;
第二步,用制备的仿生亲和分离材料纯化乳铁蛋白。
2.根据权利要求1所述的乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征是,所述基础层析介质是葡聚糖凝胶、交联的葡聚糖珠、烯丙基葡聚糖和N,N’-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚物、琼脂糖凝胶、琼脂糖与葡聚糖的交联共聚物、聚丙烯酰胺/琼脂糖复合物珠、纤维素珠和涂有化学活性基团的硅胶中一种。
3.根据权利要求1所述的乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征是,所述用制备的仿生亲和分离材料纯化乳铁蛋白,是指:用合成的亲和分离材料制备成亲和层析柱,将乳清样品流经该亲和层析柱,乳铁蛋白吸附在亲和层析柱上,未结合的其它蛋白被洗去,改变缓冲液条件将结合的乳铁蛋白洗脱下来,得到乳铁蛋白粗品。
4.根据权利要求1或3所述的乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征是,所述用制备的仿生亲和分离材料纯化乳铁蛋白,其中亲和介质吸附乳铁蛋白的条件为pH6.0-7.5,NaCl浓度为0.0-0.2M的缓冲液。
5.根据权利要求1或3所述的乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征是,所述用制备的仿生亲和分离材料纯化乳铁蛋白,其中亲和介质洗脱条件为pH 2.0-3.0,NaCl浓度为0-0.15M的缓冲液。
6.根据权利要求1或3所述的乳铁蛋白的亲和纯化方法,其特征是,所述的乳铁蛋白,其原料为牛乳、羊奶或人乳。
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