[发明专利]一种微生物细胞生物转化白桦脂醇合成白桦脂酸的方法

权利要求书

1.一种微生物细胞生物转化白桦脂醇合成白桦脂酸的方法，包括：

(1)向培养液中接入黄绿蜜环菌(Armillaria luteo-virens Sacc.)ZJUQH CGMCC No.1884，得到预反应体系；

(2)向步骤(1)得到的预反应体系中加入白桦脂醇溶液，于25～30℃转化反应5～7天得到转化后的培养液；

其中白桦脂醇用量以每升培养液计为0.01～0.1g；

(3)转化后的培养液经后处理得到白桦脂酸；

其中，步骤(1)所述的培养液为马铃薯葡萄糖液体；所述的黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884为黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884孢子悬浮液，培养液与黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884孢子悬浮液的体积比为6～30；接入菌种后于25～30℃培养1～3天得到预反应体系；

或者，步骤(1)所述的培养液为含有葡萄糖的磷酸缓冲液，葡萄糖的质量百分比浓度为2％，该缓冲液的pH为6；所述黄绿蜜环菌ZJUQHCGMCC No.1884为黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884湿细胞，其中培养液的毫升数：黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884湿细胞的克数＝5～6；

或者，步骤(1)所述的培养液为葡萄糖水溶液，葡萄糖的质量百分比浓度为2％，自然pH；所述黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884为黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884湿细胞，其中培养液的毫升数：黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884湿细胞的克数＝5～6。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述的转化反应温度优选28℃；所述的转化反应时间优选6天；所述的白桦脂醇溶液为白桦脂醇的二甲基亚砜溶液，白桦脂醇溶液中的白桦脂醇的浓度为7.5mg/ml；白桦脂醇用量以每升培养液计为0.05g。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述黄绿蜜环菌ZJUQHCGMCC No.1884孢子悬浮液中黄绿蜜环菌ZJUQH CGMCC No.1884孢子浓度为1×106个/毫升～1×108个/毫升；接入菌种后于28℃培养3天得到预反应体系。

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述的白桦脂醇溶液中添加有无水乙醇和吐温80，各物质体积比为：

无水乙醇∶吐温80∶白桦脂醇溶液＝8∶1∶2.25。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中后处理包括：将转化后的培养液进行离心处理得到上清液，调节至pH3～4，用乙酸乙酯萃取后得到萃取液，经浓缩得到白桦脂酸。