[发明专利]一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法

权利要求书

1.一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)在总体积为1ml的有机硅烷前驱体中，加入0.5ml的去离子水，30μl的0.1mol/l的盐酸或氢氧化钠溶液，并在200～250rpm，0～10℃条件搅拌30min，形成均匀的溶胶；

2)向溶胶中加入含有0.005～0.02g脂肪酶的缓冲液，缓冲液的浓度为0.03M，pH7.0～9.0，缓冲液用量为0.5～1ml；搅拌10～20min后，在100rpm条件下继续搅拌1～3h；在4～10℃条件下静置老化过夜，于25～35℃条件下真空干燥7～10天，研磨，得到包埋固定化脂肪酶；

3)将浓度为0.1～3mol/L的环戊烯酮、浓度为2～10mol/L的酰基供体、体积为5～10ml的溶剂混合，加入25mg的包埋固定化脂肪酶在转速为200～250rpm的摇床中进行反应；反应温度为30～50℃，得到S型环戊烯酮。

2.根据权利要求1所述的一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于所述的脂肪酶为：Pseudomonas aeruginosa、Arthrobacter sp.或Acinetobacter sp.。

3.根据权利要求1所述的一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于所述的有机硅烷前驱体为：甲基三甲氧基硅烷、丙基三甲氧基硅烷、丁基三甲氧基硅烷、辛基三甲氧基硅烷、γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷或γ-甲基丙烯酰氧丙基甲基二甲氧基硅烷。

4.根据权利要求1所述的一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于所述的有机硅烷前驱体为：甲基三甲氧基硅烷、丙基三甲氧基硅烷、丁基三甲氧基硅烷、辛基三甲氧基硅烷、γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷或γ-甲基丙烯酰氧丙基甲基二甲氧基硅烷与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯的混合物，其摩尔比1：3～3：1。

5.根据权利要求1所述的一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于所述的溶剂为：乙腈、异丙醚、甲苯或乙酸乙烯酯。

6.根据权利要求1所述的一种溶胶凝胶包埋固定化酶制备S型环戊烯酮的方法，其特征在于所述的酰基供体为：乙酸乙烯酯、醋酸异丙烯酯或乙酸酐。