[发明专利]适合在毕赤酵母中表达的抗氧化肽基因及其载体

权利要求书

1、一种适合在毕赤酵母中表达的抗氧化肽基因及其载体，其特征是：设计的串联基因的结构为：XhoI-信号切割序列-抗氧化肽基因-终止密码子-NotI，目的基因序列为：CTC GAGAAA AGA GAG GCT GAA GCT GTT CAC TTG AAG CCA TAA GCGGCCGC。

2、一种适合在毕赤酵母中表达的抗氧化肽基因及其载体，其特征是：

根据目的基因序列，设计了以下2条寡核苷酸，用于基因合成。AOP-15’-TC GAG AAA AGA GAG GCT GAA GCT GTT CAC TTG AAG CCA TAA GC-3’AOP-25-GGCCGC TTA TGG CTT CAA GTG AAC AGC TTC AGC CTC TCT TTT C-3’

将毕赤酵母表达载体pGAP用XhoI、NotI双酶切，回收载体片段。将载体片段、AOP-1、AOP-2混合，进行连接反应。

连接反应体系：

去离子水           3μL

10×ligase Buffer  1μL

AOP-1(20μM)        1μL

AOP-2(20μM)        1μL

pGAP载体片段       3μL

T4 ligase          1μL

总体积             10μL

连接反应条件：23℃过夜

将连接产物转化大肠杆菌DH5α，在含卡那霉素的LB平板上筛选转化子，获得含有目的序列的转化子，即为抗氧化肽基因毕赤酵母表达载体。