[发明专利]一种HIV药物筛选细胞模型及其专用假型慢病毒无效
| 申请号: | 200810118435.0 | 申请日: | 2008-08-15 |
| 公开(公告)号: | CN101353666A | 公开(公告)日: | 2009-01-28 |
| 发明(设计)人: | 童贻刚;李敬云;张昕;安小平;周育森 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 |
| 主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/867;C12N7/01;C12N5/10;C12Q1/70;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
| 地址: | 100071北京市丰台区东大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 hiv 药物 筛选 细胞 模型 及其 专用 假型慢 病毒 | ||
1.假型慢病毒在HIV药物筛选中的应用,所述假型慢病毒是通过如下方法得到的:
将混合质粒共转染哺乳动物细胞,得到假型慢病毒;所述哺乳动物细胞为HEK 293细胞、293T细胞、293FT细胞或Hela细胞;
所述混合质粒,包括表达HIV的Gag基因和Pol基因的重组表达质粒、表达报告基因的重组慢病毒质粒、表达HIV的Rev基因的重组表达质粒和表达疱疹性口炎病毒壳G糖蛋白基因的重组表达质粒;
所述表达HIV的Gag基因和Pol基因的重组表达质粒为图1所示的pGag-Pol;所述表达报告基因的重组慢病毒质粒为图2所示的pLenti-Luc;所述表达HIV的Rev基因的重组表达质粒为图3所示的pRev,所述表达疱疹性口炎病毒壳G糖蛋白基因的重组表达质粒为pVSV-G。
2.细胞模型在HIV药物筛选中的应用,所述细胞模型是用假型慢病毒感染的哺乳动物细胞;所述哺乳动物细胞为HEK 293细胞、293T细胞、293FT细胞或Hela细胞;
所述假型慢病毒是通过如下方法得到的:
将混合质粒共转染哺乳动物细胞,得到假型慢病毒;所述哺乳动物细胞为HEK 293细胞、293T细胞、293FT细胞或Hela细胞;
所述混合质粒,包括表达HIV的Gag基因和Pol基因的重组表达质粒、表达报告基因的重组慢病毒质粒、表达HIV的Rev基因的重组表达质粒和表达疱疹性口炎病毒壳G糖蛋白基因的重组表达质粒;
所述表达HIV的Gag基因和Pol基因的重组表达质粒为图1所示的pGag-Pol;所述表达报告基因的重组慢病毒质粒为图2所示的pLenti-Luc;所述表达HIV的Rev基因的重组表达质粒为图3所示的pRev,所述表达疱疹性口炎病毒壳G糖蛋白基因的重组表达质粒为pVSV-G。
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