[发明专利]灵芝孢子破壁率的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及真菌孢子破壁率的测定方法，尤其是灵芝孢子破壁率 的测定方法。

背景技术

灵芝孢子有两层十分坚实的孢壁，不容易受化学和外力破坏，对 孢子内部有一定的保护作用，因而不利于人体的消化和有效功能成分 的吸收，甚至服用后，部分孢子在粪便中仍然完整无缺。为了提高灵 芝孢子粉的保健、药效功能，破壁处理是灵芝孢子产品加工过程中的 一项非常重要的工序，孢子的破壁率已经成为灵芝孢子产品质量鉴定 的必要指标之一。目前常用的方法是用一定浓度孢子的水悬浮液，点 滴于血球计数板上，在显微镜下读出破壁前后完整孢子的数量，然后 计算出单位重量所含完整孢子的数量，利用公式

计算出孢子的“破壁率”。在检测中，孢子在悬浮液中的分散均匀度 对测定数据的准确性有极大的影响。一个分布不均、结块太多的孢子 悬浮液，不仅难以读出孢子数量，更无法保证读数的精确性和代表性。 目前只能通过增加孢子的水悬浮液的密度和黏度，来改进孢子的悬浮 性（如在孢子的水悬浮液中加蔗糖、食盐或硫酸锌等），以及使用高 速剪切搅拌来达到均匀分散孢子的目的。尽管如此，孢子平均分散的 程度和可靠性还是不能保证，这可从图1、图2中看出。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术中的不足之处，提供一种使 孢子平均分散的程度较高，能较为精确的测定灵芝孢子破壁率的方 法。

本发明为一种灵芝孢子破壁率的测定方法,其要点在于：（1）取 适量同一批次的灵芝未破壁孢子粉A和破壁后孢子粉B，在未破壁孢 子粉及破壁孢子粉B分别加入固体分散剂充分混合，用液体溶剂分别 稀释上述两种混合物，定容后，混合均匀；

（2）分别取上述两份灵芝孢子粉悬浮液点滴在血球计数板上， 在显微镜下,读出孢子粉破壁前后所含完整孢子的数量，计算出单位 重量所含完整孢子的数量，利用公式

计算出孢子破壁率。

本发明利用“干物颗粒间的均匀混合”原理，在孢子粉与溶剂混 合成悬浮液之前先与固体分散剂进行均匀混合，避免孢子结团以及不 能均匀分散的缺陷，达到了计数精确、检测结果具有代表性的目的。

在未破壁孢子粉A或破壁孢子粉B中所加的固体分散剂量为所取 未破壁孢子粉A或破壁孢子粉B量的0.5倍至它在溶剂中的饱和浓度 量。液体溶剂一般选用蒸馏水，固体分散剂为颗粒微小、不结块、并 可以完全溶解于所选用的液体溶剂的固体粉末或晶体，如蔗糖、食盐、 硫酸锌等，可以由一种物质构成，也可由多种物质混合而成，大小为 20-200目之间，最好是50-100目的细糖粉。当它们溶解在水里后， 也有增加水的密度和黏度的作用，有利于孢子在悬浮液中的物理稳定 性，但这不是本专利所采用的“固体分散剂”最重要的原因。

为了计量准确最好将灵芝未破壁孢子粉A和破壁后孢子粉B在与 固体分散剂混合前先进行烘干。烘干温度为50℃-80℃，烘干时间大 约3-5小时即可。

为了增加孢子在水中的分散性和减少孢子重新聚集，在定容前往 混合液中加入表面活性剂，所加的量占未破壁孢子粉A重量的 0.05%--5%之间。表面活性剂可为土温80，也可以使用其他类同的水 溶性表面活性剂或清洁剂，如家用洗涤剂、清洁剂、或乳化剂TERGITOL 等。

所谓的机械搅拌是指可以使用如超声震荡器、乳化机、磁振荡机 或旋涡混合器等来促进悬浮液的均匀混合。

由于孢子破壁后，单位重量中所含完整的未破壁的孢子数较少， 为了计量准确，所取的破壁孢子粉B的量为未破壁孢子粉A的1.5-3 倍。

本发明的优点在于利用“干物颗粒间的均匀混合”原理，在孢子 粉与水混合成悬浮液之前先与固体分散剂进行均匀混合，避免孢子结 团以及在悬浮液中不能均匀分散的缺陷，从而达到了计数精确、检测 结果具有代表性的目的。

附图说明

图1显微镜下在加糖的水溶液里的孢子分布状态

图2显微镜下在加糖和土温的水溶液里的孢子分布状态

图3显微镜下在用本专利方法处理后的孢子分布状态

图4显微镜下在用本专利方法处理后破壁孢子分布状态

具体实施方式

为了充分公开本发明的灵芝孢子粉破壁率的测定方法，以下结合 实施例加以说明，但本发明并不局限于这些实施例。

实施例1：芝孢子粉破壁率的测定，具体步骤如下：