[发明专利]海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物，其特征在于所述的海洋青霉菌为青霉114ZhengRr-1(Penicillium sp.ZhengRr-1)，已于2007年9月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 207142；所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物为(2E，4E)-1-(2，6-二羟基-3，5-二甲基苯)-己-2，4-二烯-1-酮，其分子式为C₁₄H₁₆O₃。

2.如权利要求1所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物，其特征在于其结构式为：

其中，1～12，3a，5a为碳原子的编号，海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物为白色粉末状固体，易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂中。

3.如权利要求1所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)固体培养及发酵产物的处理：取斜面菌种，接种到装有PDA培养基中进行固体培养，发酵结束后的固体发酵产物用浸提液浸提至少1次，将浸提液过滤，减压浓缩至干，得到褐色浸膏；2)化合物分离：将褐色浸膏以水溶解，依次浸提，分离，洗脱，收集70％甲醇洗脱的组分，浓缩后分离，洗脱，将收集的组分浓缩后以反相硅胶柱分离，收集50％丙酮+50％水的洗脱组分，浓缩后用硅胶分离，梯度洗脱，当石油醚∶乙酸乙酯＝100∶1时，得到海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物，即化合物(2E，4E)-1-(2，6-二羟基-3，5-二甲基苯)-己-2，4-二烯-1-酮。

4.如权利要求3所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物的制备方法，其特征在于在步骤1)中，固体培养的温度为25～28℃，培养时间为10～14d。

5.如权利要求3所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物的制备方法，其特征在于在步骤1)中，浸提液为乙酸乙酯∶甲醇∶乙酸＝80∶15∶5，每次浸提的时间为12～24h；减压浓缩采用真空浓缩，真空浓缩的温度为40～45℃。

6.如权利要求3所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物的制备方法，其特征在于在步骤2)中，等体积乙酸乙酯浸提，反相硅胶柱分离采用RP-18反相硅胶柱分离，洗脱以甲醇与水洗脱，按体积百分比，甲醇占甲醇与水总体积的30％～100％，洗脱的每个梯度为2000mL。

7.如权利要求3所述的海洋青霉菌抗肿瘤活性化合物的制备方法，其特征在于在步骤2)中，将收集的组分浓缩后以RP-18反相硅胶柱分离，以50％丙酮+50％水和70％丙酮+30％水，各400ml洗脱。