[发明专利]一种白菜类LRR抗病蛋白基因BcLRR克隆及其功能

说明书

技术领域

本发明涉及植物抗病基因工程领域，尤其涉及一种白菜类LRR抗病蛋白基因BcLRR及其编码的蛋白质以及含有该基因的载体和植物细胞系。

背景技术

植物抗病基因(resistance gene，R gene)的克隆既是深入了解植物抗病机制的基础，也是植物抗病遗传改良工程中非常重要的基因资源。目前，已经从11种不同植物中克隆出40多个R基因。分析这些R基因编码的蛋白结构发现大都具有富含亮氨酸重复(Leucine-Rich Repeats，LRRs)结构域。LRR结构域是蛋白与蛋白相互作用的一种典型结构，它在抗病蛋白中可能执行受体识别的功能。根据编码蛋白LRR区细胞定位，含有LRR结构的R基因可分为两种类型：一类是定位于胞内的受体蛋白基因，主要见于含有核苷酸结合位点(nucleotide binding site，NBS)或亮氨酸拉链(Leucine zipper，LZ)结构的R基因，如烟草抗花叶病毒的N基因，亚麻抗锈病基因L6和M基因以及拟南芥抗叶斑病的Rps2和Rpm1基因等；另一类是定位于胞外的跨膜受体蛋白基因，包括番茄抗叶霉菌Cf类基因Cf-2、Cf-4、Cf-5和Cf-9和甜菜抗胞囊线虫病基因Hs1^pro-1，以及同时还含有胞内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine-threorine kinase，STK)结构的水稻抗白叶枯病基因Xa21。在这类胞外LRR跨膜受体蛋白基因中，还有些具体功能未知的拟南芥类LRR抗病蛋白Cf-5和棉花类LRR抗病蛋白GhLRR基因。

大白菜(Brassica campestris subspecies pekinensis)是起源我国的重要蔬菜。由软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)引发的大白菜细菌性病害——软腐病是我国北方大白菜“三大病害”之一，在各白菜产区均有发生。它在田间发病较重并造成严重减产而且在贮藏过程中易引起白菜腐烂，是制约大白菜生产的重要因素。软腐欧文氏菌不仅严重威胁白菜生产，同时也危害萝卜、胡萝卜、马铃薯、番茄、马蹄莲、鸢尾、菊花等蔬菜和花卉。由于现有育种材料中缺乏该病害的抗源，通过常规育种进一步提高现有品种抗软腐病潜力已非常困难。因此，与软腐病抗性有关的抗病基因克隆与功能的研究，对于利用分子育种方法培育抗软腐病白菜等园艺作物新品种具有重要意义。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的发明人提出并完成了本发明。

因此，本发明的目的是提供一种白菜类LRR抗病蛋白基因BcLRR。

本发明的再一目的是提供上述基因编码的抗病蛋白。

本发明的另一目的是提供含有上述基因的重组表达载体。

本发明的另一目的是提供含有上述基因的转基因细胞系。

根据本发明的白菜类LRR抗病蛋白基因BcLRR，其具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，该序列包括完整开放阅读框ORF及部分5’UTR和完整3’UTR的cDNA序列，由1540个碱基组成。

SEQ ID No.1：

gcgctgcgcg taccaccaca cggcgctaat gcgccgctac agggcgcgtc catcgccatt     60

caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagct    120

ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt tttcccagtc    180

acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt gtaatacgac tcactatagg gcaagcagtg    240

gtatcaacgc agagtacgcg gggattcaca cttgattgag ctgtcaagca aaagagaaac    300

catggcttct cggtgtgagc tactcctgat ctgcgtcttg tctctcctct tcgctgtctc    360

ttactccaag acgttgaagc gagacgtgaa ggctttgaat gaaatcaaag catctttggg    420

atggagagtg gtgtattcat gggttggtga tgatccttgt ggagatggag accttcctcc     480