[发明专利]2－甲氧基雌二醇静脉纳米乳剂的制备方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及医药领域，特别是一种制备无残留有机溶剂的2-甲氧基雌二醇静脉纳米乳剂的制备方法，可用于医药生产2-甲氧基雌二醇静脉纳米乳剂的制备，以及制备2-甲氧基雌二醇微分散体，以微分散体为基础制备2-甲氧基雌二醇的其它制剂。

二、背景技术

2-甲氧基雌二醇(1，3，5-三烯-2，3，17β-三羟基-2-甲醚甾醇)是雌二醇在体内的一生理代谢产物(Schumacher G等.J CancerRes Clin Oncol.127：405～410，(2001))，具有明显的抗肿瘤活性，其抗癌机理可能是诱导肿瘤和内皮细胞凋亡(Lin HL等Cancer.92：500～509(2001))，也有抗肿瘤血管形成(Figg WD等.Invest New Drug.20：183～194(2002))以及其能抑制肿瘤细胞的增生有关(Kumar AP等.Carcinog.31：111～124(2001))。有学者在研究2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞的作用中也发现2-甲氧基雌二醇是以时间剂量依赖的方式抑制细胞增殖，其在10μmol/L时抑制作用最强(Dingli D等.Clin Cancer Res.8：3948～3954(2002))，这就要求2-甲氧基雌二醇在用于临床时一方面需要达到一个有效的血药浓度，同时要求在体内能够长时间维持一个有效的血药浓度。2-甲氧基雌二醇常规口服制剂由于药物的溶解度较小的缘故，口服制剂生物利用较差，在2-甲氧基雌二醇的I期临床研究结果表明2-甲氧基雌二醇口服无规律，药代动力学和剂量之间缺乏相关性(James J等，Invest New Drugs，25：41-48(2006))。所以2-甲氧基雌二醇注射给药形式可解决其口服制剂的缺陷。

2-甲氧基雌二醇是一种水中难溶性药物，水中溶解度小于5mg/L，对该类药物的注射液一是可采用注射混悬剂，这种注射液要求药物具有较高的药理活性，即有较小的给药剂量，并且只能肌内和皮下注射，但2-甲氧基雌二醇的常规给药剂量需要达到400mg以上；二是以有机溶剂为溶剂、或采用乙醇为溶剂加入聚氧乙烯氢化蓖麻油为增溶剂组成，使用有机溶剂及表面活性剂增溶的注射液的致命缺陷是容易引起溶血和过敏反应，且缺乏缓释和靶向性，如已经上市产品明确规定在临床使用前需要使用皮质激素、抗组胺药先进行脱敏处理。

为了解决2-甲氧基雌二醇的静脉给药问题，申请人研究了2-甲氧基雌二醇静脉纳米乳剂，但在制备工艺中需要先使用有机溶剂，如氯仿等溶解药物和磷脂，以使药物在制备静脉乳剂前先形成微分散体，虽然申请人非常清楚氯仿等有机溶剂的危害，在其制备中使用减压蒸馏方法尽可能除去其中的溶剂，大家知道磷脂是一种两亲性物质，彻底除去其中的氯仿是非常困难的。Akkar A等为解决有机溶剂残留问题在研究依曲康唑注射乳剂时是将药物直接加入到初乳中，再反复使用高压乳匀机进行均化处理得到静脉注射乳剂(Akkar A等，European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics.56：29-36(2003))，该方法存在对高压乳匀机的磨损较厉害，同时存在高压乳匀机经常被阻塞使操作过程常常中断，进行设备排阻，这对质量要求较高的注射液生产非常不利。

三、发明内容

针对上述情况，本发明之目的是提供一种2-甲氧基雌二醇静脉纳米乳剂的制备方法，可有效解决在纳米乳剂的终产品中绝对无残留对生理敏感的有机溶剂，并使高压乳匀机更加顺利地完成2-甲氧基雌二醇高含量组合物的制备问题。

其解决的技术方案是，由以下步骤实现：

(1)先取2-甲氧基雌二醇和可被超临界流体溶解的乳化剂磷脂及适量注射用油一起用超临界流体溶解(超临界流体及注射用油加入量以完全溶解2-甲氧基雌二醇为宜)，超临界流体使用压力为8M Pa～60M Pa，温度32℃～60℃，时间20min～60min，再减压分离除去超临界流体，分离压力5MPa～10MPa，得到2-甲氧基雌二醇的微分散体，其中注射用油在加入前先经0.22μm微孔滤膜过滤，等渗调节剂和不能被超临界流体溶解的乳化剂泊洛沙姆可先用注射用水溶解，再经0.22μm微孔滤膜过滤备用；

(2)制得的2-甲氧基雌二醇的微分散体中再加入不能被超临界流体溶解的乳化剂泊洛沙姆、余下的注射用油、等渗调节剂一起搅拌形成初乳；

(3)初乳通过高压乳匀机三次以上得到纳米乳剂，平均粒径小于200nm，大于1μm的粒子小于1％，(纳米乳滴的大小和均匀性和高压乳匀机的使用压力及乳匀的次数有关)，用pH调节剂调pH值为5.5～8.0；