[发明专利]实验室贴壁细胞薄膜培养装置及方法

权利要求书

1.一种实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征在于，包括平皿、有机聚合物薄膜层、粘附液层，有机聚合物薄膜层通过粘附液层贴在平皿内底面，所述有机聚合物薄膜层，其材料选用聚酯类、聚氨基酸类、壳聚糖与纤维素聚合物、离子聚合物中的一种。

2.根据权利要求1所述的实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征是，所述粘附液层，其材料选用选用甘油、丙二醇、含明胶的PBS缓冲液中的一种。

3.根据权利要求1所述的实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征是，所述聚氨基酸类为聚天冬氨酸，或聚氨酯。

4.一种实验室贴壁细胞薄膜培养方法，其特征在于，利用有机聚合物薄膜，在粘附液的作用下贴在平皿内底面，在培养时供细胞附着并在整合适应生长环境变化的抑制因素，在消化传代时直接投入到培养液中，在封闭条件下洗脱细胞，然后直接从大瓶细胞悬液中取样计数并直接分装接种，所计数目即是所有下代平皿接种细胞密度。

5.根据权利要求4所述的实验室贴壁细胞薄膜培养方法，其特征是，包括以下步骤：

第一步，按照指定平皿规格，制备并剪取或购买已生产的有机聚合物薄膜，用一滴粘附液滴在平皿底面，轻晃均匀，贴上有机聚合物薄膜；

第二步，接种培养；

第三步，传代时用胰酶或胶原酶消化，消化完毕后，将有机聚合物薄膜用无菌镊子撕起，快速投入到已准确定容的培养液瓶中，盖上瓶盖，充分摇荡或移至摇床高速摇荡10分钟，至细胞基本完全脱落形成悬液，用移液管定量分取至下一代平皿，按照第一步循环进行。

6.根据权利要求5所述的实验室贴壁细胞薄膜培养方法，其特征是，第一步中，贴上有机聚合物薄膜之后，用无菌三角玻棒轻轻涂匀，保证紧密贴合无气泡。

7.根据权利要求4或5或6所述的实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征是，所述有机聚合物薄膜，其材料选用聚酯类、聚氨基酸类、壳聚糖与纤维素聚合物、离子聚合物中的一种。

8.根据权利要求4或5所述的实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征是，所述粘附液，选用甘油、丙二醇、含明胶的PBS缓冲液中的一种。

9.根据权利要求5所述的实验室贴壁细胞薄膜培养装置，其特征是，第三步后，消化完毕后加少量血清中止并吸去，然后将有机聚合物薄膜用无菌镊子撕起。