[发明专利]一种氯霉素全抗原的制备方法无效
| 申请号： | 200810027291.8 | 申请日： | 2008-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN101250225A | 公开（公告）日： | 2008-08-27 |
| 发明（设计）人： | 田素娟;董斌;袁茵;林月霞;孟民杰;罗利琼;段涛;黄树林 | 申请（专利权）人： | 广东药学院 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/10;C07K1/14 |
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| 地址： | 510006广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 氯霉素 抗原 制备 方法 | ||
1、一种氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将琥珀酰氯霉素溶于DMF中，加入不含氨基的缓冲溶液；
(2)往(1)中加入EDC和Sulfo-NHS，反应得到甲液；
(3)称取载体蛋白质，溶于PBS溶液，配制乙液；
(4)将甲液逐滴加入到乙液中，偶联反应后纯化得到氯霉素全抗原。
2、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(1)所述缓冲溶液的pH值为4.7～6.0。
3、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(1)所述琥珀酰氯霉素与DMF的比例为23mg琥珀酰氯霉素：0.4～0.6mLDMF；所述缓冲溶液加入量为每23mg琥珀酰氯霉素加入0.5mL缓冲溶液。
4、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(2)所述EDC和Sulfo-NHS的加入量为琥珀酰氯霉素∶EDC∶sulfo-NHS摩尔比为1∶0.8～2∶0.8～2，摩尔比优选为1∶1.2∶1.2；所述反应为室温反应2小时。
5、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(3)所述载体蛋白质为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清白蛋白或血兰蛋白。
6、根据权利要求1或5所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于所述载体蛋白质为牛血清白蛋白；所述牛血清白蛋白与琥珀酰氯霉素的摩尔比为1∶35～175。
7、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(3)所述PBS溶液含有0.15M NaCl、浓度为0.05～0.1M、pH值为7.0～7.6。
8、根据权利要求1或7所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于所述PBS溶液pH值为7.4。
9、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(4)所述偶联反应为滴加完甲液后反应4小时。
10、根据权利要求1所述氯霉素全抗原的制备方法，其特征在于步骤(4)所述纯化是将偶联反应产物过Sephadex G-25层析柱脱盐，收集第一峰。
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