[发明专利]一种用于肿瘤基因治疗的重组单纯疱疹病毒

权利要求书

1.一种命名为HEPAWEL的重组单疱疹病毒，其特征在于其特异性缺失了野生型HSV-1病毒F株基因组的第117071至第131534碱基对的序列，从而使重组病毒中只包括一个拷贝的ICP0，ICP4，和ICP34.5基因。

2.一种构建重组单疱疹病毒的方法，其特征是，特异性缺失了野生型HSV-1病毒F株基因组中的内部重复区段，从而使重组病毒中只包括一个拷贝的ICP0，ICP4，和ICP34.5基因。

3.如权利要求2所述的构建重组单疱疹病毒的方法，其特征在于：

首先，将野生型HSV-1病毒F株基因组的第114517碱基对的SalI到第117071碱基对的EcorRI之间2554bp片段，及第131534碱基对的EcoRI到第133520碱基对的XhoI之间1986bp片段分别克隆到同一个pbluescriptKS的SstI和XhoI多克隆位点中构建成pKSdelIR质粒；

在质粒pKSdelIR的两个HSV片段中间的NotI切点上插入GFP表达盒，构建成质粒pKSdelIRGFP；

将质粒pKSdelIRGFP与HSV-1病毒DNA，共转染的Vero细胞上，挑选出表达GFP蛋白的绿色病毒蚀斑；

经3次纯化得到重组病毒HepaGreen；再将质粒pKSdelIR与重组病毒HepaGreen的病毒DNA共转染的Vero细胞；

从绿色病毒蚀斑挑选出无色病毒蚀斑，经纯化和鉴定为缺失了IR的HEPAWEL。

4.一种以如权利要求1所述的重组单疱病毒为骨架的携带其他外源性基因的重组病毒，其中所述其他外源性基因包括能造成肿瘤细胞凋亡的基因，能抑制血管生成的基因，以及能刺激免疫活性的基因。

5.权利要求1所述的重组单疱疹病毒在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用，所述肿瘤为胃癌、肺癌、慢性髓源性白血病或肝癌。

6.一种用于治疗胃癌、肺癌、慢性髓源性白血病或肝癌的药物，其特征在于所述药物含有权利要求1所述的重组单疱疹病毒作为活性成分。

7.权利要求5所述的重组单疱疹病毒在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于所述药物在肿瘤治疗中可以通过各种给药途径给药。

8.权利要求7所述的重组单疱疹病毒在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于所述给药途径为全身静脉注射，局部肿瘤血管内给药以及肿瘤内给药。