[发明专利]用于刺激有粘附连接的细胞进行增殖的RNAi方法和组合物

权利要求书

1.下调p120联蛋白的表达的试剂在制备用于体内刺激具有粘附连接 的人角膜内皮细胞使之增殖的药物中的应用，其中所述试剂与所述细胞短 暂地接触。

2.权利要求1所述的应用，其中所述试剂是双链RNA。

3.权利要求1的应用，其中所述试剂以脉冲形式接触所述角膜内皮细 胞。

4.权利要求3的应用，其中所述试剂应用12-72小时。

5.权利要求3的应用，其中所述试剂的退出时间是12-72小时。

6.权利要求1所述的应用，其中所述试剂接触患有角膜内皮功能障碍 的哺乳动物的眼睛。

7.权利要求1的应用，其中所述试剂应用到哺乳动物眼部的前室。

8.权利要求1所述的应用，其中所述试剂与促有丝分裂生长因子、提 高胞浆内cAMP水平的试剂、或它们的组合一起应用，其中所述提高胞浆 内cAMP水平的试剂选自：8-溴-cAMP、联丁酰基cAMP、异丁基-甲基黄 嘌呤、己酮可可碱、毛喉素、霍乱毒素、前列腺素E2(PGE2)、丁酸苯酯、 布他前列素或伊洛前列素。

9.在培养物中扩增人角膜内皮细胞单层的方法，包括：(a)将所述细胞 与下调p120联蛋白的表达的试剂短暂地接触；和(b)培养所述细胞，以形成 扩增的人角膜内皮细胞。

10.权利要求9所述的方法，其中所述试剂是RNA干扰试剂。

11.权利要求10的方法，其中所述接触以脉冲形式发生，随后撤去所 述RNA干扰试剂。

12.权利要求11的方法，其中所述试剂的脉冲应用12-72小时。

13.权利要求11的方法，其中所述试剂的退出时间是12-72小时。

14.权利要求9的方法，其中所述人角膜内皮细胞为早期汇合或晚期汇 合。

15.权利要求9所述的方法，进一步包括将所述细胞与促有丝分裂生 长因子、提高胞浆内cAMP水平的试剂、或它们的组合接触，其中所述提 高胞浆内cAMP水平的试剂选自8-溴-cAMP、联丁酰基cAMP、异丁基-甲 基黄嘌呤、己酮可可碱、毛喉素、霍乱毒素、前列腺素E2(PGE2)、丁酸苯 酯、布他前列素或伊洛前列素。

16.权利要求9的方法，其中所述扩增的人角膜内皮细胞单层被用于制 造手术移植物。