[发明专利]药物应用的干燥重建囊泡制剂

说明书

技术领域

1本发明涉及干燥重建囊泡(DRV)组合物及其水基制剂，其包含一种或多种治疗剂(例如亲水性蛋白质)。更具体地，其涉及包括至少一种脂质和融合促进剂(fusion promoting agent)的DRVs，其在重建后在水相中形成包封活性剂的大多层脂质体。 

背景技术

2已知脂质体用作生物和治疗活性化合物的载体，其促进这些化合物递送至身体。脂质体通常包括封闭的脂滴，所述脂滴具有在水性介质中典型地包含化合物的核。在特定的实施方式中，化合物化学地结合至脂质组分或仅包含在脂质体的水性内室(aqueous insidecompartment)之内。存在不同类型的脂质体：多囊泡脂质体(MVLs)，其在各脂质体颗粒内具有多个非同心水性内室(internal aqueouschamber)；多层囊泡(MLVs)，其具有一系列基本上球形的壳，直径达5μm或以上，所述壳由被水层所间散的脂质双层形成；大多层囊泡(LUVs)，直径从600nm至1μm或以上，其具有围绕大的、非结构化的水相的脂质双层；和小单层囊泡(SUVs)，其在结构上类似于LUVs，除了其直径小于约0.2μm之外。 

3脂质体的各种制备方法在本领域是已知的，其中几种描述于Liposome Technology 2^nd Edition in G.Gregoriadis，CRC Press Inc.，Boca Raton(1993)中。脂质体技术的主要挑战为将活性剂高水平的装入脂质体中，以在处理和贮存期间使该装入稳定。另一挑战在于使活性剂的释放速率适于脂质体制剂的具体目标。虽然在脂质体中生物材料的封装对于人类中的药物递送具有显著的潜力，但商业规模上封装材料的生产通常是成问题的。 

4大多数肠胃外应用的药物应用集中在小脂质体以避免不期望的副作用，例如如对于大脂质体而言的栓塞。此外，使用小脂质体，看起来更容易制造稳定的产品。 

5对于小规模或工业规模上制造MLV包封的材料存在几种已知的方法(Rao，″Preparation of Liposomes on the Industrial Scale.Problems And Perspectives，″in Liposome Technology 2^nd Editionin G.Gregoriadis，CRC Press Inc.，Boca Raton，pp 49-65(1993))。在大多数情况下，薄的脂质膜从有机溶剂沉积到容器的壁上，添加要包封材料的水性溶液，并搅拌容器。该方法引起活性剂包封入MLVs。除了生物试剂的降解和脂质体悬浮的贮存不稳定性之外，此类方法的主要缺点是包封的变化，以及通常低的和不可再生的将生物制剂包埋入脂质体。 

6如EP0678017中描述的方法生产冷冻和解冻的多层囊泡(FATMLVs)。FATMLV方法需要在要包埋的材料的存在下完成冷冻和解冻。然而，使敏感材料例如蛋白质进行此类苛刻的物理操作导致材料的失活或降解。此外，频繁的冷冻和解冻循环对大规模生产是不可行的，需要高的技术运行费用。 

7已知脂质体及其内含物在水性分散体中可能相对不稳定。因此，通过脱水增加脂质体制剂的短的贮存时间的尝试已经成为几种制备方法的焦点。 

8改进的被动包埋和包括活性剂的脂质体的贮存已经通过使用脱水-复水方法(EP0485143、WO90/03795、EP0678017及其参考文献)实现，所述方法中将预成型的脂质体加至包含活性剂的水溶液，或与冻干的蛋白质混合，然后将混合物脱水并且随后在水性介质中复水。当将该溶液干燥成高粘度脂质混合物时，单独的脂质体融合形成MLVs，其在壳层(lamellae)之间包封活性剂。复水时，形成其中包封材料的脂质囊泡。由于脂质体的不稳定性、活性剂的泄露或要包封的材料的物理失活或降解，该方法导致相当低的依赖于要包封的药物的包封率。 

9已知脱水和形成干燥脂质粉末之前添加糖类防腐剂(例如填充剂)可以保护涉及冷冻干燥的脂质体。填充剂描述于EP0678017、WO90/03795、WO97/42936、WO92/02208、EP190315和Liposomes第二版，A Practical Approach，由Vladimir P.Torchilin和VolkmarWeissig编辑，Oxford University Press(2002)。它们用来防止冷冻干燥期间囊泡的破坏和活性剂的泄露，以及避免小单层囊泡融合成大多层结构。