[发明专利]抗药物抗体测定法

说明书

发明领域

本发明包含测定抗药物抗体的方法，和用于这样的测定法的试剂盒。

发明背景

使用单克隆抗体的标准固相免疫测定法涉及在吸附在固相上的抗体 (捕获抗体)、抗原、和针对抗原另一表位、缀合了酶或可检测标记的抗 体(示踪抗体)之间形成复合物。由此形成夹心体：固相-捕获抗体-抗原- 示踪抗体。在夹心体中，抗体缀合的酶活性(或可检测标记的量)与孵育 介质中的抗原浓度成比例。一种夹心测定法为双抗原桥联免疫测定法 (double antigen bridging immunoassay)，其中捕获和示踪抗体与抗原的 不同表位结合。Hoesel，W.等人在J.Immunol.Methods 294(2004)101-110 中报道了抗EPO双抗原桥联测定法，使用了与氨基和与糖基偶联的固定 化rhEPO的混合物。免疫测定法如双抗原桥联ELISA是在研究患者对于 抗体药物的免疫原性反应中所通常应用的测定法类型。Mire-Sluis，A.R. 等人，在J.Immunol.Methods 289(2004)1-16中，总结了设计和优化检测 针对生物技术产品的宿主抗体的免疫测定法的建议。根据Mire-Sluis等人 所述，众所周知的抗药物抗体测定法形式显示出不少缺点。抗药物抗体测 定法在例如WO 2005/045058和WO 90/006515中有所提及。抗独特型抗 体测定法在例如US 5,219,730、WO 87/002778、EP 0139389和EP 0170 302中有所提及。Wadhwa，M.等人在J.Immunol.Methods 278(2003)1-17 中报道了检测、测量和表征由治疗性生物制品诱导的不必要抗体的方法。 PCT/EP2007/001935中描述了用双抗原桥联免疫测定法对样品中针对药物 抗体的抗体进行免疫测定的免疫测定法。WO 2006/066912中描述了测定 猴中的人抗体的免疫测定法。本领域中(例如US 2003/0068664)能够检 测活性治疗性抗体的测定系统同样公知。这样的系统需要抗原与固相结合， 治疗性抗体与此结合的抗原结合，及检测通过抗原而与固相结合的治疗性 抗体。

发明简述

本发明提供了与食蟹猴(Cynomolgus)IgG特异性结合、不与人IgG 结合的抗体。优选所述抗体为单克隆抗体。

在优选实施方案中，根据本发明的抗体用细胞系3.25.12(DSM ACC2799)、3.29.15(DSM ACC2800)、4.38.30(DSM ACC2801)、7.57.41 (DSM ACC2802)或7.72.32(DSM ACC2803)生产。

本发明提供了用夹心测定法，即双抗原桥联免疫测定法对猴种的样品 中药物抗体(DA)和针对所述药物抗体的抗体(抗药物抗体，ADA)的 免疫复合物进行免疫测定的方法。

所述免疫复合物进一步缩写为DA/ADA复合物。

本发明提供了免疫测定样品中DA/ADA复合物的方法，其使用包含捕 获抗体和示踪抗体的夹心型或双抗原桥联免疫测定法，特征在于所述抗体 之一，即示踪抗体或捕获抗体，是与食蟹猴IgG特异性结合的抗体，另一 抗体是与人免疫球蛋白特异性结合的抗体。

在本发明的优选实施方案中，捕获抗体为与人免疫球蛋白特异性结合 的抗人Ig抗体，示踪抗体为与食蟹猴IgG特异性结合的抗食蟹猴IgG抗 体。在本发明的优选实施方案中，捕获抗体为与食蟹猴IgG特异性结合的 抗食蟹猴IgG抗体，示踪抗体为与人Ig特异性结合的抗人Ig抗体。

优选抗人Ig抗体与人IgG特异性结合。优选抗食蟹猴IgG抗体和/或 抗人Ig抗体为单克隆抗体。优选所述特异性结合人免疫球蛋白的抗体不与 食蟹猴IgG结合。优选所述结合人免疫球蛋白的抗体由细胞系DSM ACC2708生产。优选所述结合食蟹猴IgG的抗体不与人IgG结合。优选 所述结合食蟹猴IgG的抗体由细胞系3.25.12(DSM ACC2799)、3.29.15 (DSM ACC2800)、4.38.30(DSM ACC2801)、7.57.41(DSM ACC2802) 或7.72.32(DSM ACC2803)生产。

在所述测定过程中，在抗食蟹猴IgG抗体、DA/ADA复合物和抗人Ig 抗体之间形成复合物，形成的复合物的量与DA/ADA复合物、DA和/或 ADA的浓度相关联。