[发明专利]抗人α9整联蛋白抗体及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及特异性识别人α9整联蛋白的抗体(尤其是单 克隆抗体)、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体(human antibody)；产生前述单克隆抗体的杂交瘤细胞；前述单克隆 抗体的制备方法；前述杂交瘤细胞的制备方法；含有前述抗 人α9整联蛋白抗体的治疗剂；含有前述人α9整联蛋白抗体的 诊断试剂；抑制人α9整联蛋白的活性的化合物的筛选方法等。

背景技术

生物体中，维持生命现象的最小功能单位为细胞，具有 相同功能的细胞聚集在一起构成组织，各种组织聚集并协同 而形成具有一定功能的器官，作为整体进行协调统一的生命 活动。多数组织基本由细胞和胞外基质构成，通过黏附细胞 和胞外基质的细胞-胞外基质间黏附、以及细胞间黏附而维持 构造。就胞外基质而言，一直以来认为其没有生物活性，只 是一种填充物，实际上，现已逐渐清楚其在几乎所有的组织 中起重要的作用。现在已经了解了细胞和胞外基质间黏附活 性，提示其不仅起细胞的立足点的作用，还与各种细胞功能 的调节和维持组织、器官的恒常性有关，已认识到其重要性。

连结细胞和胞外基质的黏附通过整联蛋白所代表的跨膜 细胞黏附蛋白而进行。整联蛋白构成为α链和β链1∶1的异二聚 体，迄今为止已发现18种α链，8种β链，已鉴定至少24种它们 的组合。已知各整联蛋白分别识别特异的胞外基质(配体)。 而且，还逐渐了解了含有整联蛋白的跨膜细胞黏附蛋白质的 作用不仅在于细胞和胞外基质的黏附、固定，而且还将来自 于胞外基质的信息转换为细胞内信号，承担细胞的增殖、运 动、细胞死亡、分化等的调节。

整联蛋白根据配体的特异性和功能被分类为亚家族，被 分为胶原受体、层粘连蛋白受体、识别纤连蛋白和玻连蛋白 等中包含的Arg-Gly-Asp(RGD)序列的RGD受体、只存在 于白细胞中的白细胞特异性受体(Hynes RO.2002.Integrins： Bidirectional，Allosteric Signaling Machines.Cell 110：673-87； Miyasaka M.2000.New edition of Adhesion Molecule handbook.Shujunsya.)。α4和α9整联蛋白是不属于上述任何一 个的亚家族，被称为α4整联蛋白亚家族(Elise L.Palmer， Curzio Rfiegg，Ronald Ferrando，Robert Pytela，Sheppard D. 1993.Sequence and Tissue Distribution of the Integrin a9 Subunit，a Novel Partner of 131 That Is Widely Distributed in Epithelia and Muscle.The Journal of Cell Biology 123： 1289-97)。

作为胞外基质(ECM)一种的骨桥蛋白(osteopontin；以 下简称为OPN)是分子量约41kDa的分泌型磷酸化酸性糖蛋 白，是在乳汁、尿、肾小管、破骨细胞、成骨细胞、巨噬细 胞、活化T细胞、肿瘤组织等中可见到广泛表达的分子。分子 中央部位具有细胞黏附序列GRGDS，且在人OPN中具有 SVVYGLR序列，在小鼠OPN中具有SLAYGLR序列，紧随其 后具有凝血酶酶切位点，通过GRGDS序列与RGD受体的整联 蛋白黏附，通过SVVYGLR序列或SLAYGLR序列与α4(α4β1) 和α9(α9β1)整联蛋白黏附。