[发明专利]具有抗炎作用的五加苷或其苷元制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及具有抗炎作用的五加苷或其苷元的制备方法，更具体地说，涉及具有式I或式II化合物的制备方法。本发明首次从五加科五加属植物特别是细柱五加的叶子中制得式I的五加苷及其如式II所示的苷元，方法条件温和，产物结构不被破坏，提取效率高，产品纯度高。

      R1 R2   R3 R4

式I： H  COOH H  -β-D-glc6-β-D-glc4-α-L-rha

式II：H  COOH H  H

背景技术

五加科五加属植物细柱五加Acanthopanax gracilistylus w.w.smith，临床用其根皮入药，具有祛风湿、壮筋骨、活血化瘀功能。袁文学等《沈阳药学院学报》1988年第5卷第3期报道了细柱五加根皮具有抗炎、抗疲劳、抗菌、镇静等作用。

现有技术关于细柱五加叶子活性成分研究报道较少，不利于细柱五加叶药材资源开发和利用。

发明目的

本发明主要目的是提供一种从五加科五加属植物、特别是细柱五加的叶子中提取得到的抗炎活性成分五加苷和其苷元的方法。令人意外地从五加科五加属植物、特别是细柱五加叶子中首次制备得到具有上述式I和II结构的五加苷和其苷元，并具有良好的抗炎作用。

本发明技术方案如下：

提供一种制备具有抗炎作用的式I或式II化合物的方法，包括原料粉碎、脱脂、提取、分离等步骤，其特征在于所述的原料为五加科五加属植物、尤其是细柱五加。

      R1 R2    R3  R4

式I： H  COOH  H   -β-D-glc6-β-D-glc4-α-L-rha

式II：H  COOH  H   H

上述所述的方法，其中所述的原料为细柱五加的叶子。

上述所述的方法，其中所述的脱脂用溶剂选自乙醚、石油醚、甲苯、环己烷或正己烷中一种或两种以上的混合溶剂。其中，优选用乙醚，例如采用乙醚进行回流提取进行脱脂，以除去非极性或者低极性成分。

上述所述的方法，其中所述的提取用溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮和水中一种或两种以上的混合溶剂。通常，优选采用乙醇水或者甲醇水混合溶剂，更优选为乙醇水溶剂提取提取溶剂。

上述所述的方法，其中所述的提取可选用浸泡提取、渗漉提取、加热回流提取、煎煮提取或者超声提取。优选采用加热回流提取。

上述所述的方法，其中所述的分离选自溶剂萃取分离、大孔吸附树脂柱分离、硅胶柱层析分离、氧化铝柱层析分离、聚酰胺柱层析分离、凝胶柱层析分离或者反相ODS柱中一种或两种以上。

上述所述的方法，其中，如果需要，还包括式I化合物水解制得式II化合物的步骤。其中，所述的水解，可以为酸水解、碱水解或者水解酶作用下的水解。优选式I的苷通过β-葡萄糖苷酶和纤维素酶水解制得式II化合物。

作为本发明一个具体实施方案，本发明提供一种式I和II化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)原料粉碎：将细柱五加叶粉碎到20～60目细粉；

(2)脱脂：步骤(1)细粉用乙醚进行脱脂(例如索氏提取或者加热回流方法提取)处理；

(3)提取：步骤(2)脱脂后细粉用30％～95％乙醇在40～70℃提取两次，提取液回收乙醇得到提取物；

(4)分离：步骤(3)得到的提取物通过大孔吸附树脂柱分离，用30％～100％的乙醇梯度洗脱，收取60％～100％乙醇部分，将其再用硅胶柱层析反复分离，用按体积比氯仿∶甲醇∶水为10∶1∶0、9∶1∶0.1、8∶1∶0.2、7∶1∶0.5梯度洗脱，其中，9∶1∶0.1部分再进行硅胶柱层析，用按体积比氯仿∶甲醇∶水8∶2∶0.2洗脱，得到式II化合物，用按体积比氯仿∶甲醇∶水7∶3∶0.5洗脱，得到式I化合物。

上述所述的方法，其中，如果需要，还包括式I化合物通过β-葡萄糖苷酶和纤维素酶水解制得式II化合物的步骤。

上述所述的方法，其中，如果需要，还包括对产品重结晶精制的步骤。重结晶溶剂可以为乙醇，甲醇，氯仿或他们的混合溶剂。

本发明方法首次从五加科五加属植物、特别是细柱五加的叶子中制得式I和II的五加苷和其苷元。式I和II的五加苷和其苷元，经药理试验表明具有良好的抗炎活性。本发明方法条件温和，产物结构不被破坏，提取效率高，产品纯度高。并且，本发明对于充分利用细柱五加药材资源、进一步开发细柱五加药材具有重要意义。

具体实施方式

实施例1