[发明专利]抗草甘磷的I型5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶有效
| 申请号: | 200710180284.7 | 申请日: | 2004-02-17 |
| 公开(公告)号: | CN101173273A | 公开(公告)日: | 2008-05-07 |
| 发明(设计)人: | M·F·阿利布海;C·卡雅各布;冯寄嘉;G·R·赫克;祁幼林;S·弗拉辛斯基;W·C·斯塔林斯 | 申请(专利权)人: | 孟山都技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/29;A01H1/02;C12Q1/68;C07K14/415 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 梁谋 |
| 地址: | 美国密*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 抗草甘磷 丙酮酸 莽草 磷酸 | ||
1.一种生产转基因抗草甘磷植物的方法,包括:
(a)将一种转基因植物与另一种植物杂交,其中所述转基因植物包含编码抗草甘磷I型EPSPS蛋白的DNA分子,其中所述抗草甘磷I型EPSPS蛋白包含多肽序列GX4X1X2RX3,其中X1和X2为任何氨基酸,X4为异亮氨酸或亮氨酸,X3选自苏氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和异亮氨酸;
(b)获得至少一种由步骤(a)杂交的子代植物;和
(c)选择抗草甘磷的子代植物,其中所述子代包含所述DNA分子而且是转基因抗草甘磷植物。
2.权利要求1的方法,其中所述步骤(c)包括用草甘磷喷洒所述子代。
3.权利要求1的方法,其中所述步骤(c)包括通过杂交或扩增方法检测所述DNA分子。
4.权利要求1的方法,其中所述步骤(c)包括:
(i)从步骤(b)的子代中提取DNA样品;
(ii)使所述DNA样品与抗草甘磷性状的标记核酸分子接触,其中所述标记核酸分子选自SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:44以及它们的互补物;
(iii)对所述抗草甘磷性状进行标记协助的育种方法,其中所述抗草甘磷性状与所述标记核酸分子遗传性连接。
5.权利要求1-4任一项的方法,其中所述DNA分子编码抗草甘磷I型EPSPS蛋白,所述蛋白在102位包含异亮氨酸,在106位包含选自苏氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和异亮氨酸的氨基酸。
6.权利要求5的方法,其中所述DNA分子编码抗草甘磷I型EPSPS蛋白,所述蛋白在102位包含异亮氨酸,在106位包含丙氨酸。
7.权利要求1-4任一项的方法,其中所述DNA分子编码的抗草甘磷I型EPSPS蛋白在102位包含亮氨酸,在106位包含丙氨酸。
8.权利要求1-4任一项的方法,其中所述DNA分子选自SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:44。
9.权利要求1-4任一项的方法,其中所产生的转基因抗草甘磷植物为刺槐、苜蓿、莳萝、苹果、杏树、朝鲜蓟、芝麻菜、芦笋、油梨、香蕉、大麦、豆子、甜菜、黑莓、蓝莓、绿花椰菜、抱子甘蓝、卷心菜、油菜、香瓜、胡萝卜、木薯、花椰菜、芹菜、樱桃、芫荽叶、柑橘、金钱橘、咖啡、玉米、棉花、黄瓜、花旗松、茄子、菊苣、茅菜、桉树、茴香、无花果、森林树、葫芦、葡萄、葡萄柚、蜜露、豆薯、猕猴桃、莴苣、韭菜、柠檬、酸橙、火炬松、芒果、甜瓜、蘑菇、坚果、燕麦、秋葵、洋葱、橙、观赏植物、木瓜、荷兰芹、豌豆、桃子、花生、梨、胡椒、柿子、松树、菠萝、车前草、洋李、石榴、白杨、马铃薯、南瓜、温柏、辐射松、紫叶菊苣、萝卜、树莓、稻、黑麦、高粱、南方松、大豆、菠菜、南瓜、草莓、甜菜、甘蔗、向日葵、红薯、路路通、红橘、茶、烟草、西红柿、草皮、藤本植物、西瓜、小麦、薯蓣和西葫芦。
10.一种栽培转基因抗草甘磷植物的方法,其包括:
(a)播种至少一种种子,其中所述种子包含抗草甘磷I型EPSPS蛋白的DNA分子,所述抗草甘磷I型EPSPS蛋白包含多肽序列GX4X1X2RX3,其中X1和X2为任何氨基酸,X4为异亮氨酸或亮氨酸,X3选自苏氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和异亮氨酸;和
(b)使得由所述种子生长出植株,由此培植出转基因植物,其中所述转基因植物包括所述DNA分子而且是抗草甘磷的。
11.权利要求10的方法,其中所述DNA分子编码抗草甘磷I型EPSPS蛋白,所述蛋白在102位包含异亮氨酸,在106位包含选自苏氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、丙氨酸和异亮氨酸的氨基酸。
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