[发明专利]一种高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌MP－2及其产生的海洋微生物酯酶

说明书

技术领域

本发明涉及海洋微生物领域，特别是从渤海海域底泥中筛选分离获得的一种高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌MP-2及其产生的海洋微生物酯酶。

背景技术

微生物酯酶来源于自然界的微生物，在自然界中能产生酯酶的微生物资源有陆源生物和海洋微生物，陆源微生物例如：从黄石公园温泉得到的一株耐热的极端微生物Thermus aquaticus，该菌株培养温度为80℃，DongG等人从Thermus aquaticus中分离出的胞外碱性磷酸酯酶最适温度为75～80℃；从Thermotaga neaplitana分离纯化得到胞内碱性磷酸酯酶最适温度为85℃。Thermus S p.FD3041是国内温泉分离得到的一株栖热菌，培养温度为70℃。得到的胞内碱性磷酸酯酶FD2TAP，最适温度是70℃。Pyrococcus abyssi是从深海火山中分离得到的异养古细菌，最适生长温度是100℃，得到胞内碱性磷酸酯酶的最适温度为70℃等。然而现有陆源微生物酯酶常因耐酸、耐碱或耐热性能差，应用范围受到很大限制，因此寻找具有特殊性质的微生物酯酶及其产生菌株受到世界各国的高度重视，已成为该领域关注的中心之一。

海洋环境中的微生物资源十分丰富，而且由于海洋环境条件的独特性，包括高盐、高压、低营养、低温等，造就了海洋微生物有别于陆生微生物的许多特异性，海洋环境微生物及其所产生的酶也相应具有一些特殊的性质，尤其海洋微生物酯酶具有更为独特的生理功能和广阔的应用领域。此外，海洋微生物不易培养、形态多样且在保藏和移种过程中很容易死亡等，导致对于它们种类区分的困难，不利于海洋微生物研究和开发的深入，因此若从海洋环境中定向分离各种特殊性质酯酶的产生菌，构建一个酯酶产生菌的菌种库，具有极大的实用性。

目前迫切需要开发达到快速、简便、准确可靠和良好经济性的选育分离手段和方法，以便能分离得到有用微生物菌株，为海洋微生物资源的开发利用奠定基础。

与此同时，需要建立一些简单、方便、易于操作的分类鉴定方法对海洋微生物进行分析，使人们在一定程度上更科学、更精确、更快速地找到海洋分离物的分类地位，为海洋微生物资源的开发利用奠定基础。目前，大分子rRNA已成为一个分子指标，广泛地用于各种微生物的遗传和分子差异的研究，加上大量已知微生物的DNA都已被测定并输入国际基因数据库，成为微生物鉴定分类非常有用的参照系统，从而可以通过对未知微生物DNA序列的测定和比较分析，达到以其进行快速、有效的鉴定分类的目的。

微生物酯酶是一种重要的工业酶类，涉及到酯合成、内酯合成、酯交换、多肽合成、立体异构体的转化和拆分等催化反应，酯酶催化不需要辅酶且具有反应条件温和、方法简便、催化活性高、选择性强、产物易于分离、易于回收等优点。因此广泛应用于食品工业、医药行业、日用化工业、军事和生物防护等领域。尤其嗜热酯酶的高温反应活性，以及对有机溶剂、去污剂和变性剂的较强抗性，使它在食品、医药、制革、石油开采及废物处理等方面都有广泛的应用潜力。

国际上自九十年代初到现在，相继开发出中温酯酶、高温碱性酯酶、中温碱性酯酶等，但酯酶的酶学性质仍无法满足现代工业的需求。因此从海洋中筛选出具有独特酶学性质的海洋微生物酯酶，实为微生物酯酶开发的一大进步，并将会对酶制剂工业带来新的生机和活力。从上世纪七十年代，国外就开始对产酯酶海洋细菌进行了筛选，但未见有关海洋微生物产酯酶制备和性质方面的报道(M.Chandrasekaran，1997)。我国海洋微生物酯酶研究起步较晚，仅有杨从发等人从海水，海泥海洋生物的消化道分离到碱性酯酶产生菌(杨从发，2000)。但由于海洋微生物存在海水培养和酯酶分离纯化困难等问题，限制了海洋酯酶在制备与应用方面的进一步开发。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术存在不足。经发明人长期从事海洋微生物酶学工程的开发研究及筛选菌株的基础研究中，开发出快速、简便、准确可靠和良好经济性相结合的选育分离手段，从而提供一株高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌MP-2及其产生的海洋微生物酯酶。

本发明提供的高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌MP-2，是从渤海海底淤泥中筛选分离获得的高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌Bacillus sp.MP-2(简称菌株MP-2)，于2007年6月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号这CCTCC No：M207078。

本发明提供的高产海洋微生物酯酶的芽孢杆菌MP-2的形态特征：

形态特征