[发明专利]重组杆状病毒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种重组杆状病毒，该病毒带有gp64信号肽、HA基因和gp64跨膜域基因形成的融合基因。

2.如权利要求1所述的重组杆状病毒，其中所述的gp64信号肽为SEQ ID NO.1所示的序列，HA基因为SEQ ID NO.2所示的序列，gp64跨膜域基因为SEQ ID NO.3所示的序列。

3.如权利要求1或2所述的重组杆状病毒，该病毒为家蚕杆状病毒。

4.如权利要求3所述的重组杆状病毒，该病毒保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.2033。

5.一种制备权利要求1所述的重组杆状病毒的方法，该方法包括：

(a)分别制备gp64信号肽、HA基因和gp64跨膜域基因序列；

(b)将所制备的gp64信号肽、HA基因和gp64跨膜域基因序列导入杆状病毒中，形成重组杆状病毒。

6.如权利要求5所述的方法，其中先将gp64信号肽、HA基因和gp64跨膜域基因序列形成融合基因gp64HA，再将该gp64HA克隆至转移载体中获得重组转移载体，然后使该重组转移载体与杆状病毒发生同源重组而获得重组杆状病毒。

7.如权利要求1～4任一项所述的重组杆状病毒在制备禽流感病毒疫苗中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其中所述的疫苗为人用疫苗。

9.一种制备禽流感疫苗的方法，该方法包括利用权利要求1～4任一项所述的重组杆状病毒接种家蚕，家蚕杆状病毒通过出芽方式使HA展示于其表面，对病毒粒子进行分离纯化。

10.如权利要求9所述的方法，该方法包括：利用权利要求1～4任一项所述的重组杆状病毒接种家蚕，家蚕杆状病毒出芽使HA展示于其表面，匀浆破碎细胞，多步离心去除杂质，超速离心沉淀病毒粒子，无菌溶解液重悬沉淀后，进行区带离心纯化样品，超滤脱糖和冷冻干燥。