[发明专利]一种荧蒽包被原FL－OVA及制备和用途

权利要求书

1.一种荧蒽包被原FL-OVA，其结构式如下：

其中OVA是卵清蛋白。

2.一种荧蒽包被原FL-OVA的制备方法，包括以下步骤：

(1)荧蒽半抗原的合成：将丁二酸酐、荧蒽、无水三氯化铝按摩尔比1∶1∶2.2投料，并溶解于硝基苯中，得到无色溶液，冰浴下搅拌反应，在0-4℃冰浴下，7-8小时，加入稀盐酸终止反应；将烧瓶中的液体倒出，加稀盐酸水解，分离出的有机层用大量稀盐酸水洗后，旋转蒸发除去硝基苯，得到黄色固体粉末；在甲醇-乙醚中重结晶获得黄色晶体状的荧蒽半抗原，干燥后得纯品。

(2)荧蒽人工包被原的合成：取溶有荧蒽半抗原的有机溶剂，依次加入正丁胺与氯甲酸异丁酯，室温或4℃下搅拌反应2-4小时；将上述反应液逐滴滴入用PBS溶解的蛋白质溶液中，4℃反应1-4小时，反应完毕，将溶液装入透析袋，用蒸馏水或pH6.8-7.4PBS缓冲溶液或0.9％的生理盐水透析5d；透析后离心分出上清液，即得免疫原FL-OVA偶联物，经过柱提纯后，加入等量甘油-20℃下冻干保存。

3.根据权利要求2所述的一种荧蒽包被原FL-OVA的制备方法，其特征在于，所述步骤

(1)中的荧蒽的分子结构式为：

4.根据权利要求2所述的一种荧蒽包被原FL-OVA的制备方法，其特征在于，所述步骤

(1)中的荧蒽半抗原的化学名称为荧蒽丁酸-γ-氧，分子量为302，分子结构式如下：

5.根据权利要求2所述的一种荧蒽包被原FL-OVA的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的有机溶剂是N’N-二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)。

6.根据权利要求2所述的一种荧蒽包被原FL-OVA的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述的半抗原、正丁胺、氯甲酸异丁酯、蛋白质摩尔比1∶1-4∶1-3∶0.005-0.05。

7.一种荧蒽包被原FL-OVA的用途，通过免疫动物制备成荧蒽特异性抗体，能与荧蒽发生特异性免疫反应的免疫球蛋白IgG，用于现场检测水体、土壤及大气中的痕量的荧蒽。