[发明专利]一种蛋白质分子印迹整体柱的制备方法有效
| 申请号： | 200710159108.5 | 申请日： | 2007-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN101464439A | 公开（公告）日： | 2009-06-24 |
| 发明（设计）人： | 张丽华;邓启良;刘晋湘;乔晓强;梁振;赵鹏;张玉奎 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N30/56 | 分类号： | G01N30/56 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人： | 马 驰;周秀梅 |
| 地址： | 116023*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白质 分子 印迹 整体 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种蛋白质分子印迹整体柱的制备方法，其特征在于：
以丙烯酰胺和/或甲基丙烯酰胺为功能单体，功能单体与交联剂溶于10mM的pH4.5～7.5的磷酸盐缓冲溶液中；缓冲溶液中功能单体的重量浓度为3.0～6.5％，交联剂的重量浓度0.35～0.7％；通入氮气除氧后加入模板分子，模板分子于缓冲溶液中的重量浓度为0.15～0.55％，并在0～4℃下静置2～5分钟；随后加入引发剂过硫酸铵和增速剂N，N，N`，N`-四甲基乙二胺，缓冲溶液中引发剂的重量浓度为0.08～0.2％，增速剂的重量浓度为0.1～0.15％；混合均匀后迅速注入液相色谱柱管中，放入-5～-20℃环境中聚合1～12小时；以上各物质的重量浓度均为它们在缓冲溶液中的终浓度；聚合反应结束后，用含有重量浓度9-11％十二烷基磺酸钠的体积浓度为9-11％乙酸混合液洗脱聚合物上的模板分子，获得大孔蛋白质分子印迹整体柱；最后，用pH4.5～7.5磷酸盐缓冲液冲洗柱子至色谱基线平衡即可使用；
所述模板分子为牛血清白蛋白、溶菌酶或细胞色素C；
所述功能单体除丙烯酰胺和/或甲基丙烯酰胺外，其中还含有重量浓度为0.10.4％的甲基丙烯酸。
2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述交联剂为N，N`-亚甲基双丙烯酰胺或哌嗪二丙烯酰胺。
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