[发明专利]具有肝素结合活性的新的抗微生物肽

说明书

本申请是申请号为200480013728.2、申请日为2004年5月19日、发明名称为“具有肝素结合活性的新的抗微生物肽”的申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及具有肝素结合活性的抗微生物肽，其来源于基本无抗微生物活性的内源哺乳动物蛋白质并且具有10到36个氨基酸残基，其中所述蛋白质选自层粘连蛋白同种型(laminin isoforms)、补体因子C3(complement factor C3)、富含组氨酸的糖蛋白和激肽原，其中抗微生物肽包含至少4个选自K、R和H的氨基酸残基。本发明也涉及包含所述抗微生物肽的药物组合物和抗微生物肽和/或抗微生物/药物组合物的用途。

背景技术

哺乳动物诸如人类的免疫系统成功地战胜了几种感染。然而，在一些情况下，细菌、真菌或病毒并不总是能被清除，而这可以引起局部或全身性急性感染。在围产期、烧伤或重病特护室和在无免疫应答个体中，这是需要重要关注的问题。在其它情况下，上皮表面连续的细菌存留可以引起或加重慢性病。人类中，可以例举的是慢性皮肤溃疡、特应性皮炎和其它类型的湿疹、痤疮或泌尿生殖器感染。

可以用各种药物治疗有症状的感染。也可以通过例如疫苗与一些疾病斗争。然而，疫苗不总是最好的治疗选择，并且对于一些微生物没有可用的疫苗。当无法获得保护时，就要寻求疾病的治疗。通常，通过使用杀死微生物的抗生素进行治疗。然而，在过去的许多年期间，几种微生物已经开始抵抗抗生素了。最可能地，抗性问题在不久的将来将会增加。此外，几种个体已经对抗生素产生变应反应，因此减少了有效地使用一些抗生素的可能性。

各种生物体的上皮表面连续地暴露于细菌。最近几年期间，已经认识到基于抗细菌肽的天然免疫系统在易感染的生物学边界处的最初细菌清除中起重要作用(Lehrer，R.I.，和Ganz，T.(1999)Curr OpinImmunol 11：23-27，Boman，H.G.(2000)Immunol.Rev.173，5-16)。抗微生物肽通过渗透细菌膜杀死细菌，因此特异性分子微生物靶的缺少最小化了抗性发展。

本领域已知几种与这里所述肽不相关的抗微生物肽和蛋白质。

US 6,503,881公开了是indolicidin类似物的用做抗微生物肽的阳离子肽。该阳离子肽来源于不同物种，包括动物和植物。

US 5,912,230公开了抗真菌和抗细菌的基于组氨酸的肽。该肽是基于天然人类histatin的氨基酸序列的确定部分，以及公开了真菌和细菌感染治疗的方法。

US 5,717,064公开了甲基化富含赖氨酸的裂解肽。该裂解肽抗胰蛋白酶消化，并且是非天然的。该裂解肽适于体内给药。

US 5,646,014公开了抗微生物肽。该肽是从来源于蚕血淋巴的抗微生物部分分离的。该肽显示了抗几种微生物株系诸如大肠杆菌(Escherichia coli)，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的优良的抗微生物活性。

McCabe等，J.Biol.Chem.277卷：27477-27488，2002描述了37kDa抗微生物的趋化蛋白质-azurocidin，其含有肝素结合共有基序XBBXBX和XBBBXXBX。

WO2004016653公开了基于azurocidin 20-44序列的肽。该肽含有通过二硫键连接的环结构。

US 6495516和相关的专利公开了基于杀细菌55 kDa蛋白质—杀菌/渗透性增加蛋白质(BPI)的肽。该肽发挥了抗微生物作用及具有肝素和LPS中和能力。

WO 01/81578公开了编码G偶联蛋白质-受体相关多肽的大量序列，它们可以用于大量疾病。

WO 00/27415公开了适于抑制血管生成的肽。该肽是高分子量激肽原5的类似物。BLASTp检索显示在不同物种中保守的或具有相似性的序列诸如激肽原，没有说明这种保守性区域的功能或者它们作为小肽是否究竟具有功能。

目前，已知700多种不同的抗微生物肽序列(www.bbcm.univ.trieste.it/～tossi/search.htm)，包括杀菌肽、防卫素爪蟾抗菌肽和cathelicidins。