[发明专利]动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒，由盒体、包被板以及托架构成，包被板和托架固装在盒体内，其特征在于：该托架上设置有：

(1)磺胺类药物标准溶液凹孔：其磺胺类药物标准溶液浓度为8～12mg/L，使用时用稀释液稀释至90～105μg/L后，再按1∶3稀释六个梯度；

(2)酶标记的磺胺类药物抗原工作液凹孔：其酶标记的磺胺类药物抗原工作液使用时用酶标记的磺胺类药物抗原稀释液按1∶200倍稀释；

(3)酶标记的磺胺类药物抗原稀释液凹孔：其酶标记的磺胺类药物抗原稀释液为磷酸盐缓冲溶液，pH7.4，使用时用二次水按1∶5稀释；

(4)底物显色剂A液凹孔：其底物显色剂A液为含过氧化氢脲的醋酸钠缓冲液；

(5)底物显色剂B液凹孔：其底物显色剂B液为含3，3′，5，5′-四甲基对二氨基联苯(TMB)的二甲基亚砜溶液；

(6)终止液凹孔：其终止液为1.25mol/L H₂SO₄；

(7)浓缩洗涤液凹孔：其浓缩洗涤液为1％吐温的磷酸盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述的动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒，其特征在于：所述的包被板为96孔抗磺胺类药物多克隆抗体预包被板，并且其由微孔条组成，其制备是由含多抗的磷酸盐缓冲液(pH9.6)，包被22～26小时，加入封闭液封闭、冻干、真空包装。

3.根据权利要求1所述的动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒，其特征在于：所述的封闭液为含牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求2所述的动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒，其特征在于：所述的多克隆抗体是选用雌性大白兔进行五次免疫后，由兔子的耳缘静脉采集血液进行效价检测，并离心获得抗血清，使用G-Sepharose蛋白亲和层析柱对抗血清进行纯化。

5.根据权利要求1所述的动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒，其特征在于：所述的托架为泡沫塑料材质或者纸制材质。

6.一种动物源性食品中磺胺类药物多残留检测试剂盒的检测方法：包括以下步骤：

(1).室温下样品的前处理；

(2).所有试剂及标本在检测实验前必须置室温(20℃±5℃左右)，将试剂盒打开，平衡1～2小时；

(3).将酶标记的磺胺类药物抗原工作液用酶标记的磺胺类药物抗原稀释液1∶200稀释(1份加199份稀释液)，再将PBS加入空白孔，对磺胺类药物标准溶液及待测样品进行双孔平行加样，同时加入稀释后的酶标记的磺胺类药物抗原工作液，封板振荡混匀1～3分钟，室温孵育0.5～1.5小时；

(4).洗板机洗包被板4次，将孔内液体甩掉，用吸水纸扣干，每孔加入底物显色剂A液和底物显色剂B液按14.6∶0.45比例的混合液，室温显色25～35分钟；

(5).向孔中加入终止液，轻轻振荡混匀，读取450nm吸光值。