[发明专利]区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段序列和一个酶切位点

权利要求书

1.区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段序列和RT-PCR-RFLP 方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

提取犬瘟热可疑样品RNA，利用引物组P1和P2进行两步法RT-PCR， 扩增目的片段，取全部产物进行琼脂糖凝胶纯化试验，回收829bp条 带，取部分回收产物，用BamHI进行RFLP分析，琼脂糖凝胶电泳 观察电泳条带大小和数目，若电泳出现2条带，则样品中病毒为犬瘟 热病毒疫苗株，若电泳出现3条带，则样品中病毒为犬瘟热病毒野毒 株。”

2.根据权利要求1所述的一种区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株 的一段序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于选择的目的片段位于 犬瘟热病毒NP基因的372-1200位，扩增引物为P1：5‘TTCTG AGGCA GATGA GTTCT TC 3’，P2：5‘CTTGG ATGCT ATTTC TGACA CT 3’。”

3.根据权利要求1所述的区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一 段序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于所述的BamHI核酸位点位 于犬瘟热病毒NP基因829bp片段的153位(疫苗株)或153位和608 位(野毒株)。”

4.根据权利要求2所述区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段 序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于所述的RT-PCR-RFLP分析目 的片段，切成的2个片段大小为675bp和153bp(疫苗株)，3个片段 大小为455bp、220bp和153bp(野毒株)。