[发明专利]一种带内支撑的组织工程化软骨的制备方法

权利要求书

1.一种带内支撑的组织工程化软骨的制备方法，步骤如下：

(1)制备自体骨髓基质干细胞悬液

按常规在无菌条件下抽取自体骨髓，利用全骨髓贴壁培养法分离提纯BMSCs，CO₂孵箱内培养，收集细胞制成细胞悬液备用；

(2)生物材料支架的制备

将MEDPOR制成预定的体积与形状，外裹PGA无纺网，制成MEDPOR-PGA复合支架；

(3)细胞-支架复合及培养

将MEDPOR-PGA复合支架清洗消毒后置入含10％胎牛血清的DMEM培养液预培养后，取出吸干，将上述(1)制备的自体BMSCs细胞悬液均匀滴加于复合支架表面，37℃、5％CO₂、饱和湿度的CO₂孵箱内培养培养2-4h后移入含10％FBS的DMEM的培养液内按常规继续培养，隔日换液一次，5-7天后改用软骨向诱导液继续培养，所说的软骨向诱导液为含TGF-β₁5-15ng/ml、IGF-I40-60ng/ml、胰岛素20-40ng/ml的DMEM培养液，3周后行皮下移植，皮下培养4-6周，即成带内支撑的组织工程化软骨。

2.按权利要求1所述带内支撑的组织工程化软骨的制备方法，其特征在于所说的软骨向诱导液含TGF-β₁10ng/ml、IGF-I50ng/ml、胰岛素40ng/ml。

3.权利要求1或2所述方法制备的带内支撑的组织工程化软骨。