[发明专利]生产谷胱甘肽的毕赤酵母基因工程菌及用于构建其的重组质粒

权利要求书

1.一种用于构建生产谷胱甘肽的毕赤酵母(P.pastoris)基因工程菌的重组质粒，其包括两组适于毕赤酵母表达系统的启动子和终止子，以及筛选标记和线性化位点，其中该两组启动子和终止子之间分别插有外源性的谷胱甘肽合成酶系GSH I和GSH II的基因gshI和gshII。

2.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于所述的适于毕赤酵母表达系统的启动子为非甲醇诱导型启动子。

3.如权利要求2所述的重组质粒，其特征在于所述的非甲醇诱导型启动子为GAP启动子。

4.如权利要求3所述的重组质粒，其特征在于所述的线性化位点为整合入的重组片段。

5.如权利要求4所述的重组质粒，其特征在于该重组片段为His4片段。

6.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于所述外源性的基因gshI和gshII为来源于啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的gshI和gshII基因。

7.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于所述的适于毕赤酵母表达系统的终止子为AOX1终止子。

8.如权利要求1所述的重组质粒，其特征在于其是如图1所示的将来源于啤酒酵母的gshI和gshII基因分别插入带有抗Zeocin抗生素基因作为筛选标记的质粒pGAPZαA的GAP启动子和AOX1终止子之间，并整合了重组片段His4片段的重组质粒G1G2His4pGAPZA。

9.一种生产谷胱甘肽的毕赤酵母(P.pastoris)基因工程菌，其是在毕赤酵母染色体上整合了外源性的基因gshI和gshII的基因工程菌。

10.如权利要求9所述的毕赤酵母基因工程菌，其特征在于其是将权利要求1～9任一项所述的重组质粒整合至毕赤酵母染色体上制得的基因工程菌。