[发明专利]一种检测葡萄糖的酶电极的制备方法有效
| 申请号: | 200710025323.6 | 申请日: | 2007-07-23 |
| 公开(公告)号: | CN101105471A | 公开(公告)日: | 2008-01-16 |
| 发明(设计)人: | 金万勤;徐南平;华卉;刘钰 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
| 主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327 |
| 代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 | 代理人: | 徐冬涛;袁正英 |
| 地址: | 210009江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 葡萄糖 电极 制备 方法 | ||
1.一种检测葡萄糖的酶电极的制备方法,其具体制备步骤如下:
1)将聚阳离子或聚阴离子电解质与酸液配制成离子水溶液,将支撑体电极进行预处理,然后浸入到聚阳离子电解质中,使支撑体电极表面带上正电荷;或者将预处理后的支撑体浸入到聚阴离子电解质中,则使支撑体电极表面带上负电荷;
2)将经上述步骤处理后带上正电荷支撑体电极先浸入K4Fe(CN)6或K3Fe(CN)6和KCl的水溶液中,用N2吹干,再浸入相同浓度的FeCl3或(NH4)2Fe(SO4)2和KCl的水溶液中,用N2吹干;或者是将处理后带上负电荷支撑体电极先浸入FeCl3或者(NH4)2Fe(SO4)2和KCl的水溶液中,用N2吹干再浸入相同浓度的K4Fe(CN)6或者K3Fe(CN)6和KCl的水溶液,用N2吹干;
3)重复步骤2)1-80次,得到聚电解质/普鲁士蓝膜电极;
4)分别配制葡萄糖氧化酶溶液和两种不同浓度的明胶溶液,明胶溶液2的浓度要大于明胶溶液1的浓度;取葡萄糖氧化酶溶液与明胶溶液1混合均匀;移取上述混合溶液均匀滴于步骤3)制得的电极上,置于冰箱中;然后再将处理后的电极表面浸渍到明胶溶液2中后取出,置于冰箱中后取出,得高灵敏度的检测葡萄糖的酶电极。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是所述的聚阴离子电解质为聚苯乙烯磺酸钠、聚乙烯磺酸盐、硫酸葡聚糖、硫酸软骨素、海藻酸钠、聚丙烯酸钠、聚甲基丙烯酸、肝素或硫酸肝素中的一种或其中任意两种的混合物;所述的聚阳离子电解质为聚烯丙基胺盐、聚联丙烯基二甲基铵氯化物、聚乙烯醇、胶原、壳聚糖、多聚赖氨酸或聚乙烯基亚胺盐酸盐中的一种或其中任意两种的混合物。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于聚阴离子或聚阳离子电解质与酸液配制成离子水溶液中,聚阴离子或聚阳离子电解质的浓度为0.005-0.05mol/L,离子溶液的pH值控制在1-4。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是所述的支撑体电极为金属电极或玻璃电极。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于重复步骤2)次数为5-40次,得到聚电解质/普鲁士蓝膜电极。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于步骤2)的水溶液中K4Fe(CN)6、K3Fe(CN)6、FeCl3或者(NH4)2Fe(SO4)2浓度为1-500mM,KCl浓度为0.1-0.5M。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于步骤2)中的支撑体电极在K4Fe(CN)6或K3Fe(CN)6和KCl的水溶液,或者在相同浓度的FeCl3或(NH4)2Fe(SO4)2和KCl水溶液中的浸入时间分别为20s-2min。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于步骤4)中葡萄糖氧化酶溶液的浓度100-10000IU/ml,明胶溶液1的质量百分浓度为0.1-1.5%,明胶溶液2的质量百分浓度为2-4%的。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于步骤4)中移取葡萄糖氧化酶溶液与明胶溶液1体积比为1∶10~1∶1000混合均匀。
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