[发明专利]提高毛细管区带电泳灵敏度的方法和仪器

说明书

与相关申请交互参考

本申请要求美国专利申请序列号60/693047(2005年6月23日 提交)的优先权，该申请在此被完整引用。

发明领域

本发明涉及提高毛细管区带电泳(CZE)灵敏度的新方法和仪 器。本发明尤其关注由包括在线溶胶-凝胶柱的通道组成的可以浓缩 毛细管电泳样品的仪器，以及使用该仪器提高毛细管区带电泳的灵敏 度。

发明背景

对生物分子包括蛋白质、多肽和DNA进行分析的需求日益增 长。毛细管电泳(CE)是一种基于分子的大小和电荷进行分离的方 法。在毛细管电泳中，分子进入液体填充的毛细管并受到电场的作用 (见Kemp，G.(1998)“C_{APILLARY ELECTROPHORESIS：A VERSATILE FAMILYOF ANALYTICAL TECHNIQUES}(毛细管电泳：一类多功能分析技术)，” Biotechnol.Appl.Biochem.27：9-17；Wu，D.等.(1992)。Schwartz，H等 人对毛细管电泳技术进行了综述(“S_{EPARATION OF} P_ROTEINS ANDP_EPTIDES BY C_APILLARY E_{LECTROPHORESIS}：A_{PPLICATION TO} A_NALYTICALB_IOTECHNOLOGY(蛋白和肽的毛细管电泳分离：分析型生物及栓的应 用)，”Beckman BioResearch Literature No.727484)。

由于可以实现快速、高效的样品分离并且需要的样品体积最 小，毛细管电泳(CE)已成为传统的平板凝胶电泳分离生物分子的 一个非常具有吸引力的替代方法(Monton，M.R.(2005)“R_ECENTD_EVELOPMENTS I_N C_APILLARY E_{LECTROPHORESIS}-M_ASS S_PECTROMETRYO_F P_ROTEINS A_ND P_EPTIDES(蛋白质和肽的毛细管电泳-质谱分析的新 进展)，”Anal Sci.21(1)：5-13)。人们之前描述了许多进行毛细管电泳 的方法(例如见美国专利：RE37,606；6,440,284；6,436,646；6,410,668； 6,372,353；6,358,385；6,355,709；6,316,201；6,306,273；6,274,089； 6,235,175；6,153,073；6,129,826；6,107,044；6,074,542；6,068,752； 6,042,710；6,033,546；6,001,232；5,989,399；5,976,336；5,964,995； 5,958,694；5,948,227；5,916,426；5,891,313；5,846,395；5,840,388； 5,777,096；5,741,411；5,728,282；5,695,626；5,665,216；5,582,705； 5,580,016；5,567,292；5,552,028；5,545,302；5,534,123；5,514,543； 5,503,722；5,423,966；5,421,980；5,384,024；5,374,527；5,370,777； 5,364,520；5,332,481；5,310,462；5,292,416；5,292,372；5,264,101； 5,259,939；5,139,630；5,120,413；5,112,460；5,015,350；4,865,706)。在 CE中通常使用的分离机制有两种：根据被分析物的分子大小进行分 离和根据被分析物电荷密度(电荷/质量比)的差异进行分离。