[发明专利]命名为番茄Torrado病毒的植物病毒

权利要求书

1.一种称作番茄torrado病毒(ToTV)的植物病毒，于2004年11月24日保藏在德国微生物保藏中心，保藏号为ToTV-E01(DSM16999)。

2.一种病毒，其包含选自以下序列组成的组的至少一种核酸序列：SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2，及与其具有至少50％核苷酸序列同源性的序列。

3.权利要求2的病毒，其中所述病毒与已知称作“Torrado”、“Marchitez”和/或“巧克力斑病”的番茄疾病相关，和/或其中基于基本如表1所述的分类学描述符的数字分类分析，所述病毒显示出与其同任何其它病毒的相关性相比，其与权利要求1所述病毒更加密切相关，并且其中所述病毒与导致番茄坏死损害的疾病相关。

4.一种分离的或重组的核酸或其ToTV-特异性片段，包含选自以下序列组成的组的核酸序列：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、与SEQ IDNO：1或SEQ ID NO：2具有至少50％核苷酸序列同源性的序列、其互补链和ToTV特异性片段。

5.一种表达载体，其包含权利要求4的核酸。

6.一种多核苷酸，其能在严格条件下与权利要求4的核酸杂交。

7.一种可得自权利要求1-3任一项的病毒的分离的或重组的多肽，或其ToTV-特异性片段。

8.权利要求7的多肽，其中所述多肽选自ToTV的23、26和35kDa的衣壳蛋白、解旋酶、RNA依赖性RNA聚合酶及推定的运动蛋白(MP)及其ToTV特异性片段组成的组。

9.一种包含权利要求7或8的多肽的抗原。

10.一种特异性抗权利要求9的抗原的抗体。

11.产生抗ToTV的抗体的方法，所述方法包括如下步骤：

a)提供ToTV病毒，或其蛋白质或肽片段；

b)用所述病毒、其蛋白质或肽片段免疫合适的脊椎动物宿主；和

c)从所述脊椎动物宿主的血液或脾细胞收获抗所述病毒、其蛋白质或肽片段的抗体。

12.权利要求11的方法，进一步包括以下步骤：选择产生抗体的脾细胞、将所述脾细胞与永生化杂交瘤细胞系融合，及使得所述杂交瘤融合体产生单克隆抗体。

13.可通过权利要求11或12的方法获得的抗体。

14.将病毒分离株鉴别为ToTV病毒的方法，包括将所述病毒分离株或其成分与权利要求10或13的抗体反应。

15.将病毒分离株鉴别为ToTV病毒的方法，包括将所述病毒分离株或其成分与权利要求6的多核苷酸反应。

16.检测样品中ToTV的存在的方法，包括通过将所述样品与权利要求6的多核苷酸或权利要求10或13的抗体反应而确定所述样品中ToTV病毒或其成分的存在。

17.一种鉴别ToTV-抗性植物的方法，所述方法包括如下步骤：

a)将植物或植物部分暴露于感染剂量的ToTV，

b)在所述暴露后，当出现如下任一现象时鉴别所述植物为ToTV-抗性植物：

-所述植物或植物部分中疾病症状保持不存在、或者延迟表现、或者至少严重程度降低、或者相对于易感对照植物而言是局部化的，和/或

-ToTV病毒或ToTV基因组序列不存在于所述植物或植物部分中，或者ToTV病毒的存在相对于易感对照植物而言至少在数量上降低。

18.权利要求17的方法，其中在步骤b)中所述植物或植物部分中ToTV的存在通过进行权利要求16的方法而确定。

19.一种产生ToTV-抗性植物的方法，包括如下步骤：

a)通过进行权利要求17或18的方法鉴别ToTV-抗性供体植物，

b)将所述ToTV-抗性供体植物与受体植物杂交，和

c)通过进行权利要求17或18的方法从后代植物中选择抗性植物。

20.权利要求19的方法，其中所述供体植物是茄科(Solanaceae)或葫芦科(Cucurbitaceae)的植物。