[发明专利]通过提高的分泌来生产多肽的方法

权利要求书

1.一种SEC61多肽，其选自下述多肽构成的组：

(a)具有根据SEQ ID NO：3的氨基酸序列的多肽，和

(b)具有与根据SEQ ID NO：3的氨基酸序列至少89％，优选至少90％，进一步更优选至少92％，进一步更优选至少93％，进一步更优选至少94％，进一步更优选至少95％，进一步更优选至少96％，进一步更优选至少97％，进一步更优选至少98％以及最优选至少99％的相同程度的氨基酸序列的多肽。

2.如权利要求1所述的多肽，其具有根据SEQ ID NO：9的氨基酸序列。

3.与根据SEQ ID NO：3的氨基酸序列具有至少85％相同程度的多肽，其中，对应于SEQ ID NO：3第373至379位的保守基元中的至少一个氨基酸被修饰。

4.如权利要求2所述的多肽，其中，被修饰的至少一个氨基酸处于对应于SEQ ID NO：3第376位的位置上。

5.如权利要求3所述的多肽，其中，对应于SEQ ID NO：3第376位的位置上的氨基酸被色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸或组氨酸置换，优选被色氨酸置换。

6.如权利要求2-4所述的多肽，其中，被修饰的至少一个氨基酸是丝氨酸。

7.如权利要求1或3-6中任意一项所述的多肽，其具有根据SEQ IDNO：6的氨基酸序列。

8.经过分离的多核苷酸，其包含下述核酸序列，所述核酸序列编码根据前述权利要求中任意一项所述的多肽。

9.如权利要求8所述的多核苷酸，其中，所述多核苷酸或核酸序列选自由下述物质构成的组：

(a)根据SEQ ID NO：1的多核苷酸，

(b)根据SEQ ID NO：2的核酸序列，

(c)与SEQ ID NO：2的核酸序列具有至少90％相同程度的核酸序列，以及

(d)编码下述多肽的核酸，所述多肽具有与SEQ ID NO：3的氨基酸序列实质上同源的氨基酸序列。

10.核酸构建体或表达载体，其包含权利要求8或9的编码SEC61多肽的核酸序列，所述核酸序列与一种或多种控制序列可操作地相连，所述控制序列指导所述多肽在合适的宿主中的表达。

11.如权利要求10所述的核酸构建体或表达载体，其中所述控制序列包含启动子、转录和翻译终止信号。

12.用权利要求8-11所述的多核苷酸、核酸构建体或表达载体转化的宿主细胞。

13.如权利要求12所述的宿主细胞，其中内源sec61基因被失活。

14.如权利要求12或13所述的宿主细胞，其是有丝真菌细胞。

15.如权利要求14所述的宿主细胞，其中，所述有丝真菌细胞属于选自由Aspergillus、Penicillium或Trichoderma的种构成的组的种。

16.如权利要求15所述的宿主细胞，其中，所述有丝真菌细胞属于Aspergillus niger或Aspergillus oryzae的种。

17.如权利要求12至16中任意一项所述的宿主细胞，其中，所述宿主细胞额外包含编码目标多肽的多核苷酸，或包含编码目标多肽的核酸序列的表达载体。

18.一种方法，用于生产目标多肽，所述方法包括：在有益所述目标多肽表达的条件下，培养权利要求16所述的宿主细胞，以及可选地，从培养液中回收所述目标多肽。