[发明专利]黑曲霉一次发酵生产获得多酶种高酶活复合酶

权利要求书

1.一种复合酶饲料添加剂，其特征是黑曲霉(Aspergillus nigerHQ978)菌种，经一次固态发酵即获得多酶种高酶活的产品：酸性蛋白酶10000～11000u/g、纤维素酶18000～20000u/g、木聚糖酶60000～80000u/g、β-葡聚糖酶50000～60000u/g、果胶酶18000～20000u/g以及淀粉酶、植酸酶等。该产品适用于畜、禽、水产等养殖动物饲料添加剂，一般添加量为0.1％。该菌种保藏号为：CGMCC NO：0696。

2.根据权利要求(1)所述的复合酶饲料添加剂生产工艺包括菌种制备工艺和发酵工艺；

3.根据权利要求(2)所述的菌种制备包括一、二、三级菌种，逐级放大培养菌种的工艺：

一级菌种  培养基为常规马铃薯蔗糖琼脂斜面，划线法接种，28±1℃培养96-120h。

二级菌种  培养基为麸皮和豆粕，(8∶2)，每300ml玻璃瓶装10g。料∶水为1∶0.6，121℃灭菌30min，冷却，接入一级种孢子悬液，每瓶5ml，28±1℃培养72-74h。

三级菌种  培养基同二级。方法同本公司发明专利“微生物菌种扩大培养的简易容器”，即，每个22×30cm的聚丙烯塑料袋装入经润水的培养基90g，121℃灭菌30min，冷却，接入二级种子孢子悬液，每袋15ml，29-30℃恒温培养，24h倒袋一次，即将结块抖捏成小块，继续培养；48-60h各翻袋一次。一般培养72-75h，大量黑孢子成熟，即可供发酵生产使用或冷藏备用。

4.根据权利要求(2)所述的发酵工艺：发酵培养基为麸皮60～80％、豆粕为15～35％，硫酸铵3～4％，磷酸二氢钾1～2％，自然PH值；采用固体发酵机厚层通风发酵或浅盘发酵方式生产；培养温度28～30℃，发酵时间55～60h。